T4 DNA连接酶反应液

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T4 DNA连接酶反应液图片产品货号：WH0193中文名称：T4 DNA连接酶反应液英文名称：Rapid Ligation Mix产品规格：100μl|3×100μl发货周期：1～3天产品价格：询价本产品仅可用于科研实验，严禁用于其他非科研用途！本制品是一种新型高效的T4 DNA连接酶预混液，Rapid Ligation Mix中包含基本的反应缓冲液、连接增强剂以及独特的酶保护剂和稳定剂，浓度为2×。具有高效快速、灵敏广泛、操作便捷等优点，可大大缩短连接时间、提高PCR产物的连接和克隆效率。

本制品使用方便快捷，使用时只需取适量Rapid Ligation Mix溶液，加入制备好的载体和基因片段，并加入ddH2O补足体积，使Rapid Ligation Mix溶液的浓度为1×即可，室温（22℃)进行反应，然后转化感受态。

适用范围：

·平末端的连接：平末端酶切出的载体与高保真聚合酶扩增得到的PCR产物间的连接。

·粘末端的连接：粘末端酶切出的载体与基因片段间的连接。

· T载体的连接：T载体与Taq等聚合酶扩增得到的带3＇A末端片段间的连接。

保存条件：-20℃可保存1年

预混反应液组成：

T4 DNA连接酶（0.6U/μl)、Tris-HCl,pH8.0（100mM)、MgCl2（20mM)、DTT（20mM)、ATP（2mM)、10%PEG4000等其它稳定剂和增强剂。
异丙净(标准品)Dipropetryn质量规格：分析标准品 犬Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)试剂盒 Canine Collagen Type Ⅳ,COL Ⅳ ELISA Kit  人尿素酶相关蛋白C(UreC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

异菌脲标准溶液(100μg/ml,u=4%)[3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution质量规格：100μg/ml,u=4%  英文名称HumanPGE2ELISAKit人列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠维生素E(VE)试剂盒 Mouse Vitamin E,VE ELISA Kit

异氯1(标准品)Dicapthon质量规格：分析标准品 蛋白活性稳定液10毫升 伤寒杆菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

4,4＇-滴滴滴(标准品) p, p’-DDD质量规格：分析标准品  Ratmaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)ELISA试剂盒规格：96T/48T  humansimilaoRIKENcDNA4933429F08geneELISA试剂盒人类似RIKENcDNA4933429F08基因ELISA试剂盒规格：96T/48T
RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  470-37-1华蟾毒精厂家  Cinobufagin

组蛋白H2A-K9乙酰化检测试剂盒10/20等  557-61-9二十八烷醇说明书  Octacosanol

Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格：96T/48T  14937-32-71,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖品牌  1,2,3,4,6-pentagalloylglucose

小鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒 ，英文名： PROG ELISA Kit  478-61-5小檗胺规格  Berbamine

小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA检测试剂盒Mouseulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit 96T/48T  7437-54-9甲基辛弗林盐酸盐厂家  4-hydroxyephedrine
T4 DNA连接酶反应液140147-77-9朝藿定A1说明书  Epimedin A1   英文名称RatGlycogenphosphorylaseIIELISAKit大鼠糖原1酸化酶同工酶II(GPII)规格：96T/48T

140147-77-9朝藿定A1规格  Epimedin A1   英文名称RatGlycogenphosphorylaseIIELISAKit大鼠糖原1酸化酶同工酶II(GPII)规格：96T/48T

13-去羟基印乌碱规格  13-Dehydroxyindaconintine   英文名称RatGlycogenphosphorylaseBBELISAKit大鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GPBB)规格：96T/48T

139-85-5原儿茶醛说明书  protocatechuic aldehyde  英文名称RatGlycogenphosphorylaseBBELISAKit大鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GPBB)规格：96T/48T

139-85-5原儿茶醛说明书  3,4-Dihydroxybenzaldehyde   英文名称RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/4/19 9:58:10

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