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点击次数:1053 发布时间:2022/3/17 9:20:58
储存条件:冷冻(-20℃)
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
pUC57质粒DNA(0.5μg/μl) | pUC57 DNA (0.5 μg/μl) | 100μl |
概述
pUC57质粒是基因克隆中比较常用的一种载体。PUC57 DNA的全长为2710 bp。质粒DNA详细信息见pUC57质粒图谱。
特点
纯度高,工艺纯化。
超螺旋结构DNA占总DNA的90%以上。
应用
分子克隆、测序
异佛尔酮(>98%,BR)Isophorone质量规格:>98%,BR 冰冻切片总胆(酯酶法)菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒20 HumanansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAkit 人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
异香草醛(>98%,BR)Isovanillin质量规格:>98%,BR Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISA试剂盒大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格:96T/48T HumanMyoglobin,MYO/MBELISA试剂盒人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
异香草醛(标准品)Isovanillin质量规格:>99%,标准品 小鼠脂素1(LPIN1)ELISA试剂盒 ,英文名: LPIN1 ELISA Kit 组织中链羟脂酰辅酶A脱氢酶(HYDROXYACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒20
氧化胡素(标准品)Oxypeucedanin质量规格:HPLC≥98%,标准品 犬2,3-二1酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA检测试剂盒Canine2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 96T/48T Humangasicinhibitorypolypeptide,GIPELISAKit人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
犬甲状旁腺激素(PTH)试剂盒 Canine Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 白花胡丙素规格 (+)-Praeruptorin C
英文名称HumanAngiogeninELISAKit人血管生长素(Angiogenin)规格:96T/48T 191729-43-8通关藤苷G厂家 Tenacissoside G
化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒20 191729-44-9通关藤苷I说明书 Tenacissoside I
Ratiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISA试剂盒大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒规格:96T/48T 522-97-4四氢小檗碱品牌 Tetrahydroberberine,THB
小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 ,英文名: apo-A1 ELISA Kit 524-12-9蟛蜞菊内酯规格 Wedelolactone
pUC57质粒DNA(0.5μg/μl)1453-93-620(R)原人参三醇厂家 20(R)Proanaxatriol 英文名称Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T
14534-61-3异绿原酸B品牌 Isochlorogenic acid B 英文名称Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T
1449-05-4甘草酸说明书 Glycyrrhetinic acid 英文名称RatHeatShockProtein40ELISAKit大鼠热休克蛋白40(HSP40)规格:96T/48T
1447-88-7高车素说明书 Hispidulin 英文名称RatHeatShockProtein40ELISAKit大鼠热休克蛋白40(HSP40)规格:96T/48T
144506-14-9甘草查尔酮C厂家 Licochalcone C 英文名称RatHeatShockProtein20ELISAKit大鼠热休克蛋白20(HSP20)规格:96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2023/12/1 9:38:12
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