DH5α菌株

详细内容

储存条件：冷冻（-20℃）

概述

甘油保存的菌种，一种用于质粒克隆的菌株，适用于在质粒制备时的宿主菌。

应用

感受态细胞制备、表达
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
异鼠李素(标准品）质量规格：HPLC≥98%,标准品Isorhamnetin  英文名称MouseTATELISAKit小鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)规格：96T/48T  大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 ，英文名： PROG ELISA Kit

异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside  WoodyPla完全培养基500毫升溶液/片剂 人末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA检测试剂盒HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T

异鼠李素-3-O-新橙皮苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside  rabbitprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA试剂盒兔子Ⅲ型胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  大鼠白介素21(IL-21)试剂盒 Rat Ierleukin 21,IL-21 ELISA Kit

异土木香内酯（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Isoalantolactone  小鼠白介素10(IL-10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  CLIAKitfoFPIELISAKit大鼠组织因子途径抑制物规格：48T/96T
猴α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒MonkeyIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T  142409-09-4Crovatin厂家  Crovatin

犬降钙素原(PCT)试剂盒 Canine Procalcitonin,PCT ELISA Kit  72629-76-6ProsapogeninCP6说明书  Prosapogenin CP6

英文名称Humanhemeoxygenase-1ELISAKit人血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  96315-53-6虎掌草皂甙D品牌  Huzhangoside D

化线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20  866366-86-1噻嗪二酮苷规格  Xanthiside

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T  212701-97-8噻嗪二酮厂家  Xanthiazone
DH5α菌株18085-97-7棕矢车菊素品牌  Jaceosidin   英文名称RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)规格：96T/48T

18059-10-4贝母素乙说明书  Peiminine   英文名称RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)规格：96T/48T

1802-12-6商陆皂苷元说明书  Phytolaccagenin  英文名称RatLpaELISAKit大鼠脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T

17912-87-7杨梅苷规格   Myricetrin  英文名称RatLpaELISAKit大鼠脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T

17912-87-7杨梅苷厂家  Myricetrin   英文名称Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISAKit规格：96T/48T

更新时间：2023/12/27 9:28:38

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