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点击次数:1020 发布时间:2022/3/17 9:05:09
储存条件:冷藏(2-8℃)
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
HighLipo脂质体高效转染试剂 | HighLipo transfection reagent | 0.5mL|1mL |
概述
HighLipo脂质体高效转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
镱标准溶液(1000μg/ml in 10%HCl)质量规格:1000μg/ml in 10%HCl Ytterbium standard 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA检测试剂盒HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 96T/48T Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISA试剂盒人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(ai-HAV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
锌标准溶液(1000mg/L,溶剂:1%盐酸)质量规格:1000mg/L,溶剂:1%盐酸Zinc standard 大鼠蛙皮素,雨蛙肽试剂盒 Rat Ceruletide/Cerulein/Caerulein ELISA Kit HumanCalcitonin,CTELISAKit人降钙素(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
锌标准溶液(500mg/L,溶剂:1%盐酸)质量规格:500mg/L,溶剂:1%盐酸Zinc standard 英文名称RatHAELISAKIT大鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T 人PL12抗体/抗酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
十二烷基苯磺酸钠标准溶液(1000μg/mL,溶剂:水)质量规格:1000μg/mL,溶剂:水 dodecylbenzenesulfonate solution 红细胞型抗酸酸性1酸酶(SACP)活性比色法定量检测试剂盒20 兔子Ⅰ型胶原N端肽(PⅠNP)试剂盒 Rabbit procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit
英文名称HumanPDGFELISAKit人血小板衍化生长因子(PDGF)规格:96T/48T 换规格换规格品牌 换规格
化线粒体DNA/RNA同步萃取试剂盒20 醉鱼草皂苷Ⅳ规格 buddlejasaponin IV
RatInhibin,INH-AELISA试剂盒大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T 24512-63-8栀子苷厂家 Geniposide
小鼠早期生长应答因子2(EGR2)ELISA试剂盒 ,英文名: EGR2 ELISA Kit 84687-43-4黄芪甲苷说明书 Astragaloside IV
胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T 21967-41-9黄芩苷品牌 Baicalin
HighLipo脂质体高效转染试剂2115-91-5石斛碱厂家 Dendrobine 英文名称RatPRLELISAKit大鼠催乳素(PRL)规格:96T/48T
21082-33-7苔黑酚葡萄糖苷说明书 Orcinol glucosid 英文名称Ratpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit大鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
21082-33-7苔黑酚葡萄糖苷规格 Orcinol glucoside 英文名称Ratpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit大鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
20977-05-3七叶皂苷钠品牌 Escin mono salt 英文名称RatPPAR-γELISAKit大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISAKit规格:96T/48T
20931-37-7β-倒捻子素说明书 Beta-mangostin 英文名称RatPPAR-γELISAKit大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISAKit规格:96T/48T
更新时间:2024/1/19 9:52:02
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