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点击次数:1020 发布时间:2022/3/17 9:04:18
本产品为双链DNA,分子量是31.5×106daltons,长度为48502碱基对。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
λDNA溶液(0.2mg/ml) | Lambda DNA Solution, 0.2 mg/ml | 50μg |
产品来源:
从热诱导溶原性(dam+.dcm+)中分离出来的Lambda片段(cl857 S7)。
产品组成:
组分 规格
λDNA溶液(0.2mg/mL) 250μL
说明书 1份
保存:-20℃
储存溶液:
10mM Tris-HCl (pH7.6),1mM EDTA。
镱标准溶液(1000μg/ml)质量规格:1000μg/mlYtterbium standard 人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA检测试剂盒Humanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit 96T/48T humanEndothelin1,ET-1ELISA试剂盒人内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
地西他滨/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷质量规格:>99.5%,BR,可用于细胞培养Decitabine 大鼠1酸化胰岛素受体(pISR1)试剂盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit humanHepatitisDvirusIgG,HDVIgGELISAKit人丁型肝炎IgG(HDVIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
地西他滨/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Decitabine 英文名称Rathighmobilitygroupbox-1proteinELISAKit大鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 鸡L苯解酶(PAL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷质量规格:>97%,进分sigma货号A3656 5-Aza-2′-deoxycytidine 酵母细胞周期G2期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10 人乙基二酸试剂盒 Human ethylmalonic acid ELISA Kit
载玻片细胞线粒体复合物II蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 18797-79-0紫堇灵说明书 Corynoline
Mouseadiponectin,ADPELISA试剂盒小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 紫萁酮品牌 Osmundacetone
小鼠早期生长应答因子4(EGR4)ELISA试剂盒 ,英文名: EGR4 ELISA Kit 33069-62-4紫杉醇规格 Taxol
脑素/脑尿肽(BNP)ELISA检测试剂盒Monkeybrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T 10376-48-4紫菀酮厂家 Shio
犬粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)试剂盒 Dog Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit 480-10-4紫云英苷说明书 Astragalin
λDNA溶液(0.2mg/ml)2182-14-1文多灵厂家 Vindoline 英文名称Ratprogesterone(PROG)ELISAkit大鼠孕同(PROG)ELISAKit规格:96T/48T
2174-59-65-去甲川陈皮素说明书 5-Demethylnobiletin 英文名称Ratprogesterone(PROG)ELISAkit大鼠孕同(PROG)ELISAKit规格:96T/48T
21637-25-2异槲皮苷厂家 Isoquercitrin 英文名称RatPro-ANP(1-98)ELISAKit大鼠心肽Pro-ANP(1-98)规格:96T/48T
21339-55-9相思子碱规格 Abrine 英文名称RatPro-ANP(1-98)ELISAKit大鼠心肽Pro-ANP(1-98)规格:96T/48T
212701-97-8噻嗪二酮厂家 Xanthiazone 英文名称RatPRLELISAKit大鼠催乳素(PRL)规格:96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2024/4/2 13:45:38
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