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His和SUMO双标签质粒

点击次数：1038 发布时间：2022/3/17 8:50:18

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公司名称：上海谷研实业有限公司型号：生产地址：中国大陆已获点击：1038 简单介绍： His和SUMO双标签质粒及公司热销的各类产品大鼠整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)elisa检测试剂盒售后服务
大鼠整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)elisa检测试剂盒
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa检测试剂盒图片
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa检测试剂盒
大鼠整合素αM(ITGαM)elisa检测试剂盒

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产品属性：

中文名称：His和SUMO双标签质粒
英文名称：pET-N-His-PreScission-SUMO

产品规格：1μg|100μg

本制品是一种用于表达N端同时含有His标签(His tag)和SUMO标签(SUMO tag)双标签的目的蛋白的原核表达质粒。His标签有利于通过亲和层析方法进行目的蛋白的纯化，而SUMO标签则有利于改善目的蛋白的折叠，增加目的蛋白可溶性和产量。表达后的含有目的蛋白的融合蛋白可以通过PreScission蛋白酶(货号：YT982)酶切去除His标签但保留SUMO标签，也可以通过SUMO Protease (货号：
本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有His和SUMO双标签的目的蛋白。

本载体在N端His标签后含有PreScission Protease识别的八肽序列LEVLFQGP，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease酶切除去N端的His标签，但在SUMO融合蛋白的N端还会保留两个额外的氨基酸GP。在用SUMO Protease酶切除去SUMO标签的时候，SUMO Protease识别的是SUMO蛋白的空间结构，通过无缝克隆的方式在CAGATTGGTGGA (对应氨基酸为QIGG)序列后插入目的蛋白的基因序列，在用SUMO Protease进行酶切的时候，其正好在QIGG后产生酶切，因此可以产生不带任何额外氨基酸的目的蛋白，而这是很多做蛋白结构和功能研究的研究人员所梦寐以求的。

可以采用如His-tag Purification Resin(耐还原螯合型) (货号：YT616)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (货号YT046)以及His-tag Purification Resin(变性剂耐受型) (货号：YTB4204)/His标签蛋白纯化试剂盒(变性剂耐受型)(货号：YTB046)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体(货号：YT789)检测或少量分离纯化目的蛋白。

使用说明：

次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。

100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。

pET-N-His-PreScission-SUMO质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，或者也可以同无缝克隆技术在SUMO标签之后插入目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株进行表达纯化。

操作流程：

1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。

2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；

3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
下列是公司正在热销的产品：

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更新时间：2023/12/7 10:37:26

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