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产品属性:
中文名称:AH109酵母感受态细胞
英文名称:AH109 Chemically Competent Cell
产品规格:10×100μl|50×100μl
AH109菌株来源于PJ69-2A酵母菌株,将lacZ报告基因引入PJ69-2A诞生了AH109,此菌株是GAL4系统酵母双杂实验用菌株,MATa型,可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。
Transformation marker为:trp1,leu2,报告基因为:lacZ,HIS3,ADE2,MEL1。
AH109-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。
质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒PGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768 ~881位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。
GAL4系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1 ~174位氨基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881位氨基酸区段的转录激活域(AD)。
DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。
而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。
正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成bait融合蛋白(bait-BD)和prey融合蛋白(prey-AD),如果bait和prey发生相互作用,就会促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。
AH109有四个报告基因:lacZ,HIS3,ADE2,MEL1,分别由三种不同的启动子(GAL1,GAL2,MEL1)启动,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分均不同,大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。AH109感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存三个月,经PGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。
保存条件:-80℃
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甲磺酸多沙唑嗪(标准品)Doxazosin Mesylate质量规格:HPLC>98%,标准品 猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA检测试剂盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T HumanEsiol,E3ELISAKit人雌三醇(E3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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更新时间:2024/3/27 10:51:09
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