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点击次数:1020 发布时间:2022/3/17 8:30:38
本产品是基于Topoisomerase能够在几钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒,它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶,连接效率比野生型更高。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
零背景平末端克隆试剂盒(Amp抗性) | Blunt Cloning Kit(Resistance to Ampicillin) | 25次 |
产品特点:
1. 高效快速,连接反应几乎在几钟内完成,连接率几乎达到100%。
2. 适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景,无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选,故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μl标准反应体系。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684A是含Amp抗性TOPO载体,BTN60684K是含Kan抗性TOPO载体)。
保存条件:-20℃,有效期一年。
元盐酸氟西汀Meta Fluoxetine 质量规格:美国进口 guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人甲状腺素抗体(TAb)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
伐地那非三水合盐酸盐Vardenafil trihydrate质量规格:>98%,三水合物 真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20 小鼠肝细胞生长因子受体(c-MET/HGFR)试剂盒 Mouse Hepatocyte Growth Factor Receptor,C-MET/HGFR ELISA Kit
伐地那非三水合盐酸盐(标准品)Vardenafil trihydrate质量规格:HPLC>98%,标准品 MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 血小板生长因子(PGF)ELISA试剂盒 ,英文名: PGF ELISA Kit
抑氨肽酶,乌苯美司,贝他定,苯丁抑制素Bestatin,Ubenimex质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养 小鼠列腺酸性1酸酶(ACP3)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP3 ELISA Kit MouseChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA试剂盒小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
牛结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA检测试剂盒BovineHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 96T/48T 23599-69-1去甲异波尔定厂家 Norisoboldine
人apelin 13(AP13)试剂盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit 107316-88-1去甲泽拉木醛说明书 Demethylzeylasteral
英文名称MouseIerleukin-3,IL-3ELISAKIT小鼠白介素3(IL-3)规格:96T/48T 2680-81-1去氢二异丁香酚品牌 Dehydrodiisoeugenol
冰冻切片中性脂质油红O染色试剂盒50 去氢茯苓酸规格 Dehydropachymic acid
Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISA试剂盒大鼠胆酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1630-94-4去氢钩藤碱厂家 corynoxeine
零背景平末端克隆试剂盒(Amp抗性)480-39-7乔松素厂家 Pinocembrin 植物活性内质网分离试剂盒10
480-36-4蒙花苷品牌 Buddleoside 植物核同糖1,5二1酸羧化/加氧酶活化酶(RUBPCase/RubiscoActivase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20
480-36-4蒙花苷品牌 Buddleoside 植物根瘤原生质细胞分离试剂盒5
480-19-3异鼠李素规格 Isorhamnetin 植物钙调素(CAM)ELISA检测试剂盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T
480-18-2花旗松素说明书 Taxifolin 植物钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2024/5/20 9:59:02
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