Lipofect脂质体转染试剂

详细内容

适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞。

注意事项：

无菌溶液，是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率。

储存条件：4℃，12个月
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
原薯蓣皂苷(标准品)Protodioscin质量规格：HPLC≥98%，标准品 载玻片细胞CYTOCHROMEC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  HumanCoicosterone,COELISAKit 人皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

原苏木素B/原巴西苏木素（标准品）Protosappanin B质量规格：HPLC≥98%，标准品  Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISA试剂盒人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  HumanMaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

远志酸（标准品）Polygalacic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠组蛋白脱乙酰基酶4(HDAC4)ELISA试剂盒 ，英文名： HDAC4 ELISA Kit  组织样品组织蛋白酶E(CATHEPSINE)活性比色法定量检测试剂盒20

远志皂苷元(标准品)Senegenin质量规格：HPLC≥98%，标准品 山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA检测试剂盒GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T  HumanHeatShockProtein20，HSP-20ELISAKit人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T
持久型ECL印迹化学发光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2  26342-66-5闹羊花III规格  Rhodojaponin-III

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T  69884-00-0拟人参皂苷F11厂家  Pseudoginsenoside F11

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit  98474-78-3拟人参皂苷RT5说明书  Pseudoginsenoside RT5

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒MouseSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T  1180-71-8柠檬苦素品牌  Limonin

人军团菌抗体IgM(LP Ab-IgM)试剂盒 Human Legionella aibody IgM,LP Ab-IgM ELISA Kit  20362-31-6牛蒡子苷规格  Arctiin
Lipofect脂质体转染试剂497-76-7熊果苷厂家  Arbutin  植物细胞色素C释放凋亡检测试剂盒10

491-80-5鹰嘴豆芽素A品牌  Biochanin A  植物细胞染色体分离试剂盒20

491-80-5鹰嘴豆芽素A厂家  Biochanin A   植物细胞内氧化应激活性氧(ROS)初荧光测定试剂盒50

491-70-3木犀草素品牌  Luteolin  植物细胞可溶性总核蛋白粗提制备试剂盒20

491-67-8黄芩素规格  Baicalein   植物细胞壁束缚酸性蔗糖转化酶(acidinvease)活性比色法定量检测试剂盒(胞壁)20

更新时间：2024/1/10 10:16:43

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