氯化钙细菌感受态制备液

详细内容

氯化钙转染

注意事项：

无菌溶液。原料为进口高纯度氯化钙，经高压灭菌处理。

储存条件：4℃，12个月
（标准品）质量规格：含量测定Lauric acid  RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  己糖激酶(HK)测试盒 可见分光光度法 50管/48样

结晶质量规格：>95%,BRCrystalline  小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA试剂盒大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Delta-催激素质量规格：>95%,BRDelta-MSH  Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒  HumanInhibin,INH-AELISA试剂盒人抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

内皮素2，人，犬质量规格：>95%,BREndothelin 2 (human, canine)  Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit人膜攻击复合物(MAC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
犬肾损伤分子1(Kim-1)试剂盒 Canine kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit  4233-96-9没食子儿茶素没食子酸酯规格  GCG；Epigallocatechin gallate

英文名称HumanLpaELISAKit人脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T  4233-96-9没食子儿茶素没食子酸酯厂家  GCG；Epigallocatechin gallate

沉淀法去内试剂盒20  美迪紫檀素说明书  Medicarpin

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T  480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside

小鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)ELISA试剂盒 ，英文名： TNFSF13 ELISA Kit  20283-92-5迷迭香酸规格  Rosmarinic acid
氯化钙细菌感受态制备液512-04-9薯蓣皂苷元说明书  Diosgenin  植物源性食品腰果(cashew)试剂盒20

511-96-6支脱皂苷元厂家  Gitogenin   植物源性食品小麦(wheat)试剂盒20

51059-44-0汉黄芩苷说明书  Wogonoside   植物源性食品土豆(potato)试剂盒20

510-30-5刺囊酸说明书  Echinocystic acid   植物源性食品山核桃(pecan)试剂盒20

510-30-5刺囊酸规格  Echinocystic acid   植物源性食品开心果(Pistachio)试剂盒20
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/4/7 10:20:07

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