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点击次数:1053 发布时间:2022/3/16 10:18:47
SSC缓冲溶液是分子生物学中标准的印迹和杂交处理溶液,旨在用于各种杂交实验达到变性和清洗的目的,主要成分为氯化钠和柠檬酸钠。SSC缓冲液中柠檬酸钠起缓冲作用,盐离子(Na )中和核酸主链上的负电荷,使其呈电中性,这样可以使探针和靶序列的结合比较容易进行。也用于SDS-PAGE电泳分离胶配制。用于核酸杂交,不同浓度作用不同:常用2×,及0.5×
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
20×SSC缓冲液,pH5.3 | saline sodium citrate | 100mL|500mL |
2×SSC:高盐洗膜,洗去部分非特异性结合的探针。
0.5×SSC:低盐洗膜,增加核酸链的严紧性,使得 RNA/DNA 之间的排斥力增加。
本产品为20×浓缩液,经过滤高压除菌处理,可根据实验要求使用去离子水直接稀释使用。
储存条件:常温
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
正辛基-beta-D-麦牙糖苷(>98% (HPLC),BC)n-Octyl-b-D-malyranoside质量规格:>98% (HPLC),BC Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA试剂盒小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒规格:96T/48T 微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒 ,英文名: MTF ELISA Kit
壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside质量规格:>98%,BC 小鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒 ,英文名: sTLR2 ELISA Kit Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISA试剂盒小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺Z-Gln-OH质量规格:>98%,BR 大鼠维生素A(VA)ELISA检测试剂盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T C4ELISA试剂盒鲑鱼补体蛋白4规格:96T/48T
N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly质量规格:>98%,BR 人蛋酸酶2(2A),催化亚基,β亚型(PPP2CB)试剂盒 Human PPP2CB ELISA kit guineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
英文名称HumanHLA-1ELISAKit人组织相容性抗原(HLA-1)规格:96T/48T 19908-48-6高丽槐素品牌 Maackiain
超强化学封闭溶液10毫升 548-83-4高良姜素规格 Galangin
Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA试剂盒大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 26833-87-4高三尖杉酯碱厂家 Homoharringtonine
小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员2(PV2)ELISA试剂盒 ,英文名: PV2 ELISA Kit 306-08-1高香草酸说明书 Homovanillic acid
犬内皮型合成酶(eNOS)ELISA检测试剂盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T 76-66-4钩藤碱品牌 Rhyncholphylline
20×SSC缓冲液,pH5.362-46-4硫辛酸说明书 Lipoic acid 转基因油菜(canola)HCN92品系试剂盒20
62025-50-7人参皂苷F3品牌 Ginsenoside F3 转基因油菜(canola)GT73品系试剂盒20
62025-49-4人参皂苷F2说明书 Ginsenoside F2 转基因水稻LibeyLink62品系试剂盒20
62006-39-7洋川芎内酯A品牌 Senkyunolide A 转基因棉花SGK321品系试剂盒20
6199-67-3葫芦素B品牌 Cucurbitacin B 转基因棉花MON88913品系试剂盒20
更新时间:2023/12/28 9:28:42
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