DH5α电击感受态细胞

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DH5α电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。

DH5α菌株是实验室常用的感受态细胞。

缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选。

DH5α电击感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率可达1×1010 cfu/μg DNA。

保存条件：-80℃
壮观霉素,盐酸大观霉素Spectinomycin  质量规格：>95%,BR  HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗体(glycolipid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 人抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

壮观霉素(标准品)Spectinomycin  质量规格：含量测定  Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISA试剂盒鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠流行性乙型脑炎(JE)抗体(IgG)试剂盒 Mouse Japanese Encephalitis(JE)Aibody(IgG)ELISA Kit

盐酸坦洛新/盐酸坦索罗辛Tamsulosin  质量规格：>98.5%,EP6.5   载玻片细胞RHO蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20  脂1壁酸(LTA)ELISA试剂盒 ，英文名： LTA ELISA Kit

1酸三戊酯(>98.0%(GC))Triamyl Phosphate质量规格：>98.0%(GC)  MousefactorB,BFELISAKit小鼠B因子(BF)ELISA试剂盒规格：96T/48T  HumanVaricellazostervirusIgM,VZVIgMELISA试剂盒人水痘带状疱疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
草莓完全培养基500毫升溶液/片剂  10309-37-2补骨脂酚规格  Backuchiol

RatFractalkine/CX3CL1ELISA试剂盒大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  66-97-7补骨脂素厂家  Psoralen

小鼠组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)ELISA试剂盒 ，英文名： HDAC2 ELISA Kit  19879-32-4补骨脂甲素说明书  Bavachin

山羊白介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒GoatIerleukin4,IL-4ELISAKit 96T/48T  20784-50-3补骨脂乙素品牌  Isobavachalcone 

犬胰蛋白酶原-1 试剂盒 Canine ypsinogen 1 ELISA Kit  126054-77-1苍术苷A规格  atractyloside A
DH5α电击感受态细胞84687-43-4黄芪甲苷说明书  Astragaloside IV  组织LYNA激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

84687-43-4黄芪甲苷厂家  Astragaloside IV   组织KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20

84687-42-3黄芪皂苷Ⅲ规格  Astragaloside III   组织JNK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

84680-75-1黄芪皂苷I说明书  Astragaloside I     组织ITK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

84676-89-1黄芪皂苷II品牌  Astragaloside II   组织HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定性检测试剂盒20
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/3/13 9:37:00

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