BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞

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BL21(DE3)pLysS感受态细胞携带pLysS质粒，具有氯霉素抗性。

pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于细胞壁上的肽聚糖溶解，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

该菌株染色体整合了λDE3区(DE3区含有T7RNA聚合酶)，BL21(DE3)pLysS感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

保存条件：-80℃

棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC))Methyl palmitate质量规格：Standard for GC,≥98.0%(GC)  小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA检测试剂盒Mousemaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 96T/48T  ELISAKitC4小鼠补体蛋白4规格：48T/96T

水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Methyl salicylate质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)  人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)试剂盒 Human SCF/MGF ELISA kit  Guineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))Methyl oleate质量规格：Standard for GC,≥99%(GC)  RatInsulin,INSELISAKit大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格：96T/48T  人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

癸氟奋乃静（标准品）Fluphenazine Decanoate质量规格：含量测定  BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒10/20  小鼠环加氧酶2(COX-2)试剂盒 Mouse cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit
病毒包装20样本 （R型）原人参二醇规格  20(R)Proanaxdiol

RatFibronectin,FNELISA试剂盒大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (R型)原人参三醇厂家  20(R)Proanaxatriol

小鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒 ，英文名： CTSL ELISA Kit  （R型）人参皂苷Rh1说明书  20(R)Ginsenoside Rh1

绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T  （R型）人参皂苷Rh2品牌  20(R)Ginsenoside Rh2

犬胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)试剂盒 Dog insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3 ELISA kit  15356-70-4DL-薄荷醇规格  DL-Menthol
BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞952068-64-3巴利森苷D规格  Parishin D    组织基质金属蛋白酶(MMP-3)活性比色法定量检测试剂盒20

952068-57-4巴利森苷E说明书  Parishin E    组织基质金属蛋白酶(MMP-2)生物素明胶法比色定量检测试剂盒20

95041-90-0毛兰素别名：品牌  Erianin  组织基质金属蛋白酶(MMP-2)捕获检测试剂盒20

94987-08-3绞股蓝皂苷厂家  Stevenleaf   组织基质金属蛋白酶(MMP-2)活性荧光定量检测试剂盒20

94987-08-3绞股蓝皂苷XLIX厂家  Gypenoside XLIX   组织基质金属蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量检测试剂盒20(10样本)
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/5/7 9:23:48

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