DNA转染试剂

详细内容

本试剂采用独特配方的阳离子聚合物为主要成分，可以与DNA形成稳定的复合物，保护DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 提高转染试剂/DNA复合体穿越细胞膜的效率，这种独特设计，显著提高了基因转染效率。此类试剂是目非病毒介导方法中效率高的转染试剂（不同种类细胞的转染效率可有明显差异）。此外本品不被血清清除，血清和抗生素不影响其转染效果，转染试剂/DNA复合物可以直接加入完全细胞培养基中。本品的细胞毒性很小，在适宜的条件下，根据推荐用量使用本试剂进行转染实验，细胞存活率高于90%.每一批产品出厂

产品特点

1.适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染

2.适用于瞬时转染和稳定转染

3.适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染

4.转染效率高且稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染

5.细胞毒性低

6..转染程序简单，转染实验可以在半小时内完成

注意事项：

1. 少量使用本试剂时，可取精确量的本试剂用无菌超纯水稀释一定倍数，以便精确取样量。该稀释液可在4℃保存1月左右。

2. 细胞的生长状态是转染效率的一个主要决定因素。在实验条件许可的情况下，使用高质量的培养液、优质血清等，可能会明显提高转染效率。

3. 本试剂在转染中不受血清影响，所以本试剂/DNA复合物能直接加到含血清的培养基中，但稀释本试剂和DNA的缓冲液不能混有血清，因为本品在制备本试剂/DNA复合物之可能会与血清中的蛋白质反应，影响转染效率。

4. 如果细胞株很敏感，孵育2～4小时后除去转染复合物并加入含血清的新鲜培养基。

储存条件：4℃，有效期1年。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
Alpha乙酸香树脂醇酯 HPLC≥98% 5mg 冰冻切片组织CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

betaD吡喃葡萄糖等效羟基氧代贝壳杉烯酸酯 HPLC≥98% 5mg RatClusterin,CLUELISA试剂盒大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格：96T/48T

BETA细辛脑 HPLC≥98% 5mg 小鼠纤维介素蛋白(FGL2)ELISA试剂盒 ，英文名： FGL2 ELISA Kit

beta香树精 HPLC≥98% 5mg 兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒RabbitE-SelectinELISAkit 96T/48T

β胸苷 HPLC≥98% 5mg 牛乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)试剂盒 Bovine Acetyl-CoA Carboxylase Syhetase,ACC ELISA kit

Beta育亨宾 HPLC≥98% 5mg 英文名称humanET-1ELISAKIT人内皮素-1(ET-1)ELISAKIT规格：96T/48T

Corylifol A HPLC≥98% 5mg 蛋白质西方杂交10倍清理缓冲液500毫升

D(+)阿拉伯糖醇 HPLC≥98% 5mg RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA试剂盒大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DeO甲基乙酰香兰酮色烯 HPLC≥98% 5mg 小鼠纤维胶凝蛋白1(FCN1)ELISA试剂盒 ，英文名： FCN1 ELISA Kit

Ent,环氧基海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg 兔子α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
人钙敏感受体(CaSR)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CASR, CAR, EIG8, FHH, FIH, GPRC2A, HHC, HHC1, HYPOC1, NSHPT, PCAR1, calcium sensing receptor, hCasR, Calcium-sensing receptor+CaSR Human CaSR(Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组CaSR浓度
DNA转染试剂人甲状腺球蛋白(TG)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:AITD3, TGN Human TG(Thyroglobulin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组TG浓度

更新时间：2024/1/10 10:14:46

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