2×pSC-T vector快速连接预混液

详细内容

Easy Clone T-vector是一种PCR产物高效TA克隆的用T载体。 它由pBluescript II KS载体改造而成：保留了pBluescript II KS载 体全部的酶切位点；PCR产物插入位点处于多克隆酶切位点的中间，其两侧都有众多的酶切位点可供选择。由于本载体以pBluescript II KS 载体为基础构建而成，所以它具有同pBluescript II KS载体相同的 功能：PCR产物插入后可以利用a-互补性进行蓝白斑筛选，挑选阳性克隆。

  传统T载体在进行连接时的操作程序是：载体、片段、T4 DNA Ligase Buffer、T4 DNA Ligase。本制品是在传统模式上将除了插入片段的各成分进行预混，并使其在稳定性、转化子数目、阳性率方面 不低于传统模式，使用时只需加入插入片段即可，大大简化了操作过程，降低了配制连接体系过程中的误差和污染率，节省了时间。

产品特点：

高效：快速连接，15分钟即可完成连接反应

稳定：-20℃取出反复冻融20次，克隆数目及阳性率不受影响

快捷：只需加入插入片段，在补充去热源水到10μl体系即可，省去了分步取样的繁琐

便利：附赠2×Taq MasterMix ，2×Fast Taq MasterMix (快速PCR系统) ，及 DNA Ladder 2000 Plus，满足您的PCR鉴定、电泳实验需要。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
千里光非灵 HPLC≥98% 5mg 1摩尔ISpH8.0分子生物溶液500毫升

千年健醇 A HPLC≥98% 5mg Mousecross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISA试剂盒小鼠Ⅰ型胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五味子素 B HPLC≥98% 5mg 小鼠雄激素(androgen)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

异菖蒲烯二醇 HPLC≥98% 5mg Rat galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒

蔷薇酸,＇野鸦椿酸 HPLC≥98% 5mg Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 人葡萄糖60酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

羟基大黄素 HPLC≥98% 5mg ChickenAcetoaceticacid,ACACELISA试剂盒鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

秦艽甲素 HPLC≥98% 5mg 杂交清洗液500毫升

秦皮素啶 HPLC≥98% 5mg MouseHyaluronicacid,HAELISAKit小鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

球花苦苷 HPLC≥98% 5mg 小鼠雄(ASD)ELISA试剂盒 ，英文名： ASD ELISA Kit

球松素 HPLC≥98% 5mg 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA检测试剂盒Mouseα-GlucosidaseELISAKit 96T/48T
人L选择素(SELL)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CD62L, LAM1, LAM-1, LECAM1,Leu-8, LEU8, LNHR, LSEL, Lyam-1, LYAM1, PLNHR, TQ1 Human SELL(L-Selectin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组SELL浓度
2×pSC-T vector快速连接预混液人β干扰素(IFN-β)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IFNB1, IFB, IFF, IFNB Human IFN-β(Interferon Beta) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组IFN-β浓度

更新时间：2023/12/5 10:04:37

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