2×pED-T vector快速连接预混液

详细内容

 Easy Digestion T-vector是一种PCR产物高效TA克隆的用T载 体，它由pTZ19R载体改造而成。Easy Digestion T-vector在插入位点两端特别设计了两个BamH I位点，使插入片段可以用BamH I单酶切检测及亚克隆，另外还可以使用非常廉价和高效的EcoR I与Hind III双 酶切检测及亚克隆。

 
 传统T载体在进行连接时的操作程序是：载体、片段、T4 DNA Ligase Buffer、T4 DNA Ligase。本制品是在传统模式上将除了插入片段的各成分进行预混，并使其在稳定性、转化子数目、阳性率方面不低于传统模式，使用时只需加入插入片段即可，大大简化了操作过程，降低了配制连接体系过程中的误差和污染率，节省了时间。

产品特点：

高效：提供2×Quick Ligation Buffer快速连接，15分钟即可完成连接反应。

稳定：-20℃取出反复冻融20次，克隆数目及阳性率不受影响。

快捷：只需加入插入片段，在补充去热源水到10μl体系即可，省去了分步取样的繁琐。

便利：附赠2×Taq MasterMix，2×Fast Taq MasterMix(快速PCR系统)，及DNA Ladder 2000 Plus满足您的PCR鉴定、电泳实验需求。
攀登鱼藤异黄酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠嗅素4(OLFM4)ELISA试剂盒 ，英文名： OLFM4 ELISA Kit

泡桐素 HPLC≥98% 5mg 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA检测试剂盒RabbitPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 96T/48T

霹雳萝芙辛碱 HPLC≥98% 5mg 犬5羟色胺(5-HT)试剂盒 Canine 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit

啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg 英文名称humanPGFELISAKIT人列腺素F型(PGF)规格：96T/48T

匹西狄醇A HPLC≥98% 5mg 蛋白定量样品预处理试剂100

葡萄醇 D HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蒲公英赛酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠雄激素受体(AR)ELISA试剂盒 ，英文名： AR ELISA Kit

齐墩果酸乙酸酯 HPLC≥98% 5mg 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA检测试剂盒MouseactivatedproteinC,APCELISAKit 96T/48T

千层塔烯二醇，锯齿石松烯二醇，山芝烯二醇 HPLC≥98% 5mg 人黄体生成素(LH)试剂盒 Human leinizing hormone,LH ELISA kit

千金藤碱 HPLC≥98% 5mg RatComplemefragme5a,C5aELISAKit大鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人骨涎蛋白(BSP)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IBSP, BNSP, BSP, BSP-II, SP-II, Integrin-Binding Bone Sialoprotein Human BSP(Bone Sialoprotein) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组BSP浓度
2×pED-T vector快速连接预混液人玻连蛋白(VTN)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:V75, VN, VNT Human VTN(Vitronectin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组VTN浓度
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/2/1 9:33:40

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