pBalbTrx-EK质粒

详细内容

本质粒以Nco I线性化方式提供，请配合BalbRec PCR产物一步无缝克隆试剂盒使用（CatNo. JN0001）。

  Trx是实验室中常用的融合标签，能够促进目标蛋白质的溶解性和正确折叠。在需要用肠激酶（Enterokinase, CatNo. PJN0015）切除的时候，由于S Tag中存在非特异性降解位点，酶切条件难以控制，常出现两条标签带（17KD,14KD），pBalbTrx通过删除部分氨基酸序列，在保留原有Trx融合蛋白质优势的同时，避免了非特异性酶切，使酶切结果的判断和目标蛋白质的分离变的更加方便。在不希望使用肠激酶切割时，也可通过KpnI或BglII位点引入Tev或其他蛋白酶切割位点。

  目的基因扩增按常规方法设计引物后，在5′端引物添加以下序列：GAC GAT GAT GAC AAG； 3′端引物添加：TTC GGA TCC GAT ATC。注意：5′端引物从个氨基酸不能为Pro。不希望目标蛋白C端保留His Tag时，3′端引物需要加入终止密码子。
美洲茶酸 HPLC≥98% 5mg 蛋白定量样品预处理试剂100

迷迭香酸甲酯 HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

米内苷 HPLC≥98% 5mg 小鼠序列相似家族135成员B(FAM135B)ELISA试剂盒 ，英文名： FAM135B ELISA Kit

米仔兰碱 HPLC≥98% 5mg 兔子血小板活化因子(PAF)ELISA检测试剂盒rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T

米仔兰酸碱 HPLC≥98% 5mg 犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒 Canine Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit

绵枣儿素  HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanPSAELISAKit人列腺特异性抗原(PSA)规格：96T/48T

木里岚二醇 HPLC≥98% 5mg 蛋白定量样品预处理试剂100

苜蓿素 HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

穆茱萸内酯醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 ，英文名： BrdU ELISA Kit

南五味子酸 HPLC≥98% 5mg 小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA检测试剂盒MouseypsinELISAKit 96T/48T
人金属硫蛋白1(MT1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:MT1A, MT1S, MTC Human MT1(Metallothionein 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组MT1浓度
pBalbTrx-EK质粒人胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IGFBP5, IBP5 Human IGFBP-5(Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组IGFBP-5浓度
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2023/11/6 14:18:06

快速询价

留言框
感兴趣的产品：	*
您的单位：	*
您的姓名：	*
联系电话：	*
详细地址：
常用邮箱：
您的任何要求、意见或建议： *
验证码：	*