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BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞

点击次数：1024 发布时间：2022/3/15 14:01:00

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公司名称：上海谷研实业有限公司型号：生产地址：中国大陆已获点击：1024 简单介绍： BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞及公司热销的各类产品FITC标记的驴抗兔IgG
FITC标记的羊抗小鼠IgG
FITC标记的兔抗小鼠IgG
FITC标记的羊抗人IgG
Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgM

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产品属性：

中文名称：BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
英文名称：E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell

产品规格：10*100μl

本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λDE3 区(
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。

以下实验以100μl感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。

3. 42℃热击90，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。

4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：

1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白，佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

操作流程：

1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。

2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；

3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
下列是公司正在热销的产品：

樱草素 HPLC≥98% 20mg 大量植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒5(20克/)

鹰嘴豆芽素A HPLC≥98% 20mg Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA试剂盒大鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硬飞燕草碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒，英文名： IRS1 ELISA Kit

硬脂酸甲酯 GC≥98% 50mg 兔子白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA检测试剂盒rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 96T/48T

油酸鉴别 0.1ml 犬促肾上皮质激素释放激素(CRH)试剂盒 Dog coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit

油酸甲酯 GC≥98% 100mg 英文名称HumanDHEAELISAKit人脱氢表雄同(DHEA)规格：96T/48T

柚皮苷 HPLC≥98% 20mg 大量植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒5(20克/)

柚皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA试剂盒大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

柚皮素 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒，英文名： ISR-β ELISA Kit

柚皮素O葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 10mg 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA检测试剂盒MouseAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T
人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶联免疫吸附测定试剂盒别称:VCAM1, CD106, INCAM-100, vascular cell adhesion molecule 1 Human VCAM-1/CD106(Vascular Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit 用途该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组VCAM-1/CD106浓度
BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞人铁调素25(Hepc25)酶联免疫吸附测定试剂盒别称:Hepc25, Hepcidin-25 Human Hepc25(Hepcidin 25) ELISA Kit 用途该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组Hepc25浓度

更新时间：2024/5/7 9:23:47

标签：BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞

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