细胞可渗透钙离子荧光探针

详细内容

Indo-1是一种细胞生物学常用的钙离子荧光探针，与Fura-2为目使用广泛的比率法测定的钙荧光指示剂，Indo-1能特异性地结合Ca2+，同时可发出荧光，结合Ca2+后的大发射波长从结合的475nm向400nm（Ca2+饱和时）偏移，该信号变化可被流式细胞仪较好的捕捉：在氩离子激光器的351-364光谱范围内单一波长激发该探针，在400nm和475nm的波长处分别检测结合钙离子和未结合钙离子的荧光信号，通过二者荧光强度的比率测定钙离子浓度。

由于Indo-1是性大的酸性化合物，无法进入细胞内，为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯，使其成为Indo-1/AM，该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷，大的提高了细胞渗透性。在细胞内，Indo-1/AM被酯酶水解成Indo-1后可与胞浆游离Ca2+可逆性结合。

CAS：112926-02-0

分子式：C47H51N3O22

分子量：1009.91

Ex/Em：346nm/475nm

溶解性：溶于DMSO

储存条件：-20℃，有效期6个月

Indo-1是一种细胞生物学常用的钙离子荧光探针，与Fura-2为目使用广泛的比率法测定的钙荧光指示剂，Indo-1能特异性地结合Ca2+，同时可发出荧光，结合Ca2+后的大发射波长从结合的475nm向400nm（Ca2+饱和时）偏移，该信号变化可被流式细胞仪较好的捕捉：在氩离子激光器的351-364光谱范围内单一波长激发该探针，在400nm和475nm的波长处分别检测结合钙离子和未结合钙离子的荧光信号，通过二者荧光强度的比率测定钙离子浓度。

由于Indo-1是性大的酸性化合物，无法进入细胞内，为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯，使其成为Indo-1/AM，该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷，大的提高了细胞渗透性。在细胞内，Indo-1/AM被酯酶水解成Indo-1后可与胞浆游离Ca2+可逆性结合。

CAS：112926-02-0

分子式：C47H51N3O22

分子量：1009.91

Ex/Em：346nm/475nm

溶解性：溶于DMSO

储存条件：-20℃，有效期6个月

糖原染色是病理学中常规的染色方法，高碘酸-雪夫技术是McManus在1946年先使用的，常用来显示糖原和其他多糖，而且还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。阿利新蓝和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性粘液和酸性粘液。

阿利新蓝（又称阿尔辛蓝、爱先蓝），是类铜钛花青染料，这种阳离子染料与酸性基团结合，即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物，可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS技术可将中性粘液染成红色，由于阿利新蓝与雪夫试剂结合并发生反应，又将既含中性粘液又含酸性粘液的组织和细胞染成深浅不同的紫色。终，实验结果中酸性粘液物质呈蓝色，中性粘液物质呈红色，混合粘液物质呈紫红色，细胞核呈浅蓝色。

产品组份：

阿利新蓝染液（蓝色液体）————20 ml

高碘酸溶液（无色液体）—————20 ml

雪夫试剂（淡红色液体）—————20 ml

苏木素（紫红色液体）——————20 ml

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）试剂盒临用半小时取出恢复室温，用后应放回冰箱保存。

3）雪夫试剂染色时间不宜过长，一般组织变色后即可。

4）苏木素复染细胞核时应淡染，这样与阿利新蓝容易区别，也可以选择不染。

储存条件：室温，有效期36个月
大鼠补体蛋白3(C3)elisa分析检测试剂盒

大鼠补体AH50 elisa分析检测试剂盒

大鼠波形蛋白(VIM)elisa分析检测试剂盒

大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa分析检测试剂盒

大鼠丙二酸单酰辅酶A脱羧酶(MLYCD)elisa分析检测试剂盒
大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)elisa检测试剂盒

大鼠纤连蛋白(FN)elisa检测试剂盒

大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa检测试剂盒

大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)elisa检测试剂盒

大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)elisa检测试剂盒
细胞可渗透钙离子荧光探针人补体片段4d(C4d)elisa分析检测试剂盒

人补体片段4d(C4d)elisa检测试剂盒

人补体片断3a(C3a)elisa分析检测试剂盒

人补体片断3a(C3a)elisa检测试剂盒免费代测

人补体片断3b(C3b)elisa分析检测试剂盒
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/3/11 9:57:09

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