细胞膜绿色荧光探针(DiO)

详细内容

长链二烷基羰花青化合物，特别是Dil，广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中，进行顺行或逆行的神经示踪分析。Dil 不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。Dil 标记运动神经元，可在培养基条件下持续跟踪长达四周，在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元，0.2~0.6mm/每天/固定标本，在活体组织里，可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织，Dil 的扩增可以持续长达1~2 年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移，除非质膜被破坏，比如切片部位。

储存：-20℃，避光，有效期12个月。

大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)elisa检测试剂盒

大鼠白介素1受体(IL-1RⅠ)elisa检测试剂盒

大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(sIL-1RⅡ)elisa检测试剂盒

大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa检测试剂盒

大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa检测试剂盒
大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)elisa检测试剂盒

大鼠糖化血红蛋白(GHbA1C)elisa检测试剂盒

大鼠糖蛋白130(gp130)elisa检测试剂盒

大鼠碳酸酐酶2(CA-2)elisa检测试剂盒

大鼠碳酸酐酶(CA)elisa检测试剂盒
细胞膜绿色荧光探针(DiO)人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)elisa分析检测试剂盒

人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)elisa检测试剂盒

人白介素1受体相关激酶-4(IRAK-4)elisa分析检测试剂盒

人白介素1受体相关激酶-4(IRAK-4)elisa检测试剂盒免费代测

人白介素1受体样1(IL1RL1)elisa分析检测试剂盒
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/4/17 10:39:18

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