2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
L-VALINEL-缬酸美国药典级白色固体RTsigma
289-95-2嘧啶;二氮三烯六环;间(二)氮本PyriMidine;1,3-Di;Mi;M-Di
山羊血清(无菌)5克
2-基-5-酚 2-Amino-5-methylphenol,98% 2835-98-5 25G 通用试剂
霉酚酸/麦考酚酸/E-4-甲基-6-(1,3-二氢-7-甲基-4-羟基-6-甲氧基-3-氧代-5-异苯并基)-4-己烯酸/Mycophenolic acid 超纯,98%, 1/10克 国产/进口
毛地黄皂苷shēng huà shì jì容量:RT5克
四庚基溴化铵;溴化四庚铵 TqtrchqptylcMMoniuM broMidq 4368-21-8
2,4-Diiodoaniline 533-70-0
二三胺(DETA) Diethylenetriamine,99% 111-40-0 100ML 通用试剂
Taq plus酶/Taq plus DNA聚合酶/Taq plus DNA Polymerase BR,5u/ul,99% 500u 国产/进口
钠石灰shēng huà shì jì容量:RT25克
39635-79-5四溴双酚 S4,4'-Sulphonylbis(2,6-dibromopxenol)
锇,英文名或英文缩写:Osmium,级别:BR,40%,规格:100毫克
3,5-二硝基三 3,5-benzotrifluoride,99% 401-99-0 5G 通用试剂
甲基紫6B/甲基青莲6B/煌紫/亮紫/五甲基副品红碱/Methyl violet 6B 色固, 25克 国产/进口
MZACAgar
25L incubation media 25L
抗生链霉菌 产磷酸二脂酸 支/瓶
VTMBroth
大鼠雪旺细胞;RSC96品牌ColumbiaBloodAgarMedium
改良甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础250g用于蜡样芽孢杆菌分离培养和计数
心浸液琼脂 Heart Infusion Agar 用于培养营养要求高的微生物
麦康凯琼脂3号 Maconkey Agar No.3 250 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
沙氏葡萄糖琼脂培养基250g/瓶用于真菌培养和检测incubationmedia沙氏葡萄糖琼脂培养基250g/瓶用于真菌培养和检测
LST-MUG
注意事项: