1. 收到 大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱
特征特性 GH3细胞系是由Tashjian AH等在1965年7月从一只7月龄的雌性Wistar-Furth大鼠的垂体肿瘤中分离建立的。GH3细胞系不是直接来源于GH1细胞系的克隆,而是从原代培养的GH1细胞在大鼠身上传代两次形成的肿瘤中建立的。上皮样的GH3细胞比GH1分泌更高水平的生长激素,也可产生催乳素。对调控GH3细胞分泌蛋白类激素的研究表明,可以刺激生长激素的分泌、抑制催乳素的产生。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
pLomefloxacinxy7nochloride盐酸扶罗沙星100毫克BR,50-70%
7790-60-5钨酸钾potewwium tungstate
PTSA对磺酸500毫克超纯,99%
钠 Sodium formate,≥99.0% 141-53-7 100G 通用试剂
溴丙烷 n-propyl bromide,99% 106-94-5 100ML 通用试剂
碱式乙酸铝100克
814-94-8草酸亚锡Stannous oxalate
钼酸shēng huà shì jì容量:RT250克
S-羧甲基-L-半胱酸 S-Carboxymethyl-L-cysteine ,99% 638-23-3 1G 通用试剂
高录醋铁 IRON(III) PqRCHLORcTq HYDRcTq 1201-61-3
卡尔费休试剂(含),英文名或英文缩写:Karl Flscher reagent,级别:BR,94%,规格:100克
(ATP,2Na,3H2O5'-三磷酸腺苷)
ACRYL/BISSOLUTION(30%)29:1丙烯酰胺/甲叉溶液 30% 29:1500MLCOLD
无水乳糖 cnxy7nous Lcctosq 1963/4/3
N-Acetyl-D-ProlineN-乙酰-D-脯酸1克BR,98%
PotassiumTelluriteBloodAgarBase
Listeria enrichment broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉汤 1.10549.0500 MERCK默克 incubation media Listeria enrichment broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉汤 1.10549.0500 MERCK默克
庆大霉素琼脂 250g 用于菌的选择性分离培养。
大鼠垂体瘤细胞;GH3多少钱小鼠神经干细胞成星形胶质细胞诱导分化培养基Mouseneuralstemcellsintoastrocytesinduceddifferentiationmedium
0.5%葡萄糖肉汤培养基 250g 用于环氧消毒和电离辐射消毒过程监测指示菌(枯草杆菌黑色变种芽孢及短小杆菌芽孢)的培养(GB标准)
Bolton肉汤250g用于空肠弯曲菌的增菌(GB标准)
弧菌显色培养基 Vibrio Chromogenic Medium 用于弧菌的显色培养,副溶血性弧菌显蓝色,菌显红色,其它弧菌显红色或无色
Half –Fraser 添加剂 Half-Fraser Supplement 5ml*2 添加到HB4190中,用于李氏菌的选择性增菌培养
3%氯胰蛋白胨大豆琼脂250g/瓶用于副溶血性弧菌纯化incubationmedia3%氯胰蛋白胨大豆琼脂250g/瓶用于副溶血性弧菌纯化
LactoseBileFermentBroth