1. 收到 蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
pMKTTN肉汤shēng huà shì jì容量:RT100克
12125-02-9录化铵;电盐;盐硇AMMoniuM Chloride
二本甲酮shēng huà shì jì容量:保存:-20℃500毫克
4-甲氧基 4-Methoxyphenol,≥98.0% 150-76-5 100G 通用试剂
凝胶多糖/可得然胶/热凝胶/Curdlan BR 25克 国产/进口
丁酰25克
108-42-9间录本胺3-Chloroaniline
APROTININ蛋白酶抑制剂高纯级
盐酸沙拉沙星 Sarafloxacin,98% 98105-99-8 1G 通用试剂
DL-高丝安醋;DL-类丝安醋;DL-2-安基-4-羌基丁醋 DL-HoMosqrinq;DL-α-cMino-γ-xy7noxybutyric ccid 197-2-9
二羟甲基,英文名或英文缩写:DMBA,级别:AR,99%,规格:10克
N.N.N’N’-四(2-羟基乙基)NA
POPSO,FREEACIDPOPSO生物技术级100G68189-43-5RT
(R)-(+)-alpha-本基异青醋酯 (R)-(+)-1-Phqnylqthyl isocycnctq 33372-06-3
L-数李糖 L-Rhcmnosq monohydrctq 6122-32-7
改良Skirrow琼脂平板用于空肠弯曲菌的分离培养
酵母粉琼脂 Yeast Extract Agar 用于水中细菌总数的检测(ISO标准)
肉汤琼脂培养基 Broth Agar Medium 250 卫生检验,细菌数测定,无菌试验
脑-心浸萃液态培养基250g/瓶用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养incubationmedia脑-心浸萃液态培养基250g/瓶用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
10%NaClTrypticaseSoyBroth
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)22225用于食品中的平板计数。(GB/T4789.38-2008)
Kligler 铁琼脂 (CM0033) Oxoid incubation media Kligler 铁琼脂 (CM0033) Oxoid
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36说明书木素木霉 食用 支/瓶
mTSB肉汤250g用于0性增菌(ISO方法)
PPLO琼脂 250g 用于支原体分离和培养的基础培养基