1. 收到家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌 后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
pMBHAresin4-氢胺树脂100克BR
9050-68-4葡聚糖凝胶 G25SEPHADEX G-10
SaturatedpicricacidBuffersolution饱和苦味酸缓冲液500克IND
2,3,6-三 2,3,6-Trifluoro,96% 104451-70-9 1G 通用试剂
龙脑/2-莰醇/冰片/龙胆/合成龙脑/内型-1,7,7-基-二环2.2.1庚-2-醇/樟醇/钓樟醇/Borneol BR,55%, 100/500克 国产
对叔丁基本酸,英文名或英文缩写:PTBBA,级别:BR,99%,规格:250毫克
(2-(N-啉)乙磺酸)
9-Fluorenylmetxanol芴100毫克AR,98%
4,4,4 -三拂-1-本基-1,3-丁二同 99% BqNZOYL-1,1,1-TRIFLUOROcCqTONq 1936/6/7
Furoicacid呋喃酸5克BR
酚酞络合指示剂100克
三异炳基亚鳞醋酯 Triisopropyl phosphitq 116-17-6
3-Bromo-2-xy7noxypyridine 13466-43-8
甲基庚烯酮 Methyl hepte,≥98.0% 110-93-0 25G 通用试剂
葡萄糖氧化酶/GOX/GOD/Glucose oxidase BR,100-250u/mg 10\50\250ku 国产/进口
Iodinesolution
固氮根瘤菌培养基 250g 用于固氮菌的分离培养
家猪皮肤细胞;SSC-S1品牌肠道菌计数琼脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 250 用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别(MERCK方法)
胰酪胨大豆琼脂培养基250g/瓶用于细菌培养及抑菌剂效力检查incubationmedia胰酪胨大豆琼脂培养基250g/瓶用于细菌培养及抑菌剂效力检查
MFC琼脂平板(9cm) 10个/包 用于大肠菌群的滤膜法检测
L-GmediumBase,Modified
M 17 agar acc.to TERZAGHI M17琼脂 1.15108.0500 MERCK默克 incubation media M 17 agar acc.to TERZAGHI M17琼脂 1.15108.0500 MERCK默克
SCDLP液体培养基 250g 用于疏水性化妆品样品处理及化妆品和一次性使用卫生用品增菌培养(化妆品卫生规范微生物检验方法2...
F344大鼠星形胶质细胞完全培养基MediumF344ofastrocytesinrats
Pick’sBrothBaseB