详细内容
点击次数:1039 发布时间:2022/2/16 8:30:37
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒直销 | 50管/48样、100管/96样 | 微量法、紫外分光光度法 | GOY-01S6460 |
测定意义
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶,广泛存在于动植物和微生物体内,催化1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸,产生1分子ATP,具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能,广泛应用于药物靶标设计。
测定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
RIPA裂解液(强)0 ml2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester1241117
RNaseA溶液×1ml 2-Hydroxyquinoxaline11967
RNase-free水/DEPC水0ml /0ml2-Hydroxy-methylanthraqui1724
Spectinomycin solution 壮观霉素溶液5×1ml2-Flurbiprofen5154氟比洛芬
Streptomycin solution 链霉素溶液5×1ml2-Fluoroadenosine1468
去氢齿孔酸 HPLC≥98% 10mg MouseMethemoglobin,MHBELISA试剂盒小鼠高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大花双参苷A HPLC≥98% 20mg MouseMethemoglobin,MHBELISA试剂盒小鼠高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
吴茱萸苷 HPLC≥98% 20mg MouseMethylaseELISA试剂盒小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新苦参酮 HPLC≥98% 2mg Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA试剂盒小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新苦参醇 HPLC≥98% 2mg MouseMotilin,MTLELISA试剂盒小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
单密利特苷 HPLC≥98% 5mg MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲氧基喜树碱 HPLC≥98% 20mg Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
车叶草苷酸甲酯 HPLC≥98% 10mg Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
冬青苷O HPLC≥98% 20mg MouseMucin-7,MUC7ELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg Mousemyelinbasicprotein,MBPELISA试剂盒小鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒直销兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISAKit 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3
兔氧化低密度脂蛋白 英文名称: Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein 规格: 48T/96T 英文缩写: oxLDL Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二钠 分子式:C20H21N5O6
兔血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔血小板衍化生长因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0%
更新时间:2024/3/7 10:09:31
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