详细内容
测定意义
PK(EC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶,也是产生ATP的关键酶,因此测定PK活性具有重要意义。
测定原理
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
丙酮酸激酶(PK)测试盒特供 | 50管/48样、100管/96样 | 微量法、紫外分光光度法 | GOY-01S6453 |
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
POU5F1-OCT44μgAnthraqui-carboxylic acid1178蒽醌-羧酸
c-Myc4μgAnthraqui,5-disulfonic acid di salt8535蒽醌,5-二磺酸二钠盐
BDNF4μgAnthraglycoside B233131大黄素-O-葡萄糖苷
KLF44μgAnthraflavic acid84-二羟蒽醌
LMNB14μgAnnonacin11355
去甲二氢愈创木酸 HPLC≥97% 20mg GST融合蛋白阳性表达点状印迹筛选试剂盒10
去甲基雏叶龙胆酮 HPLC≥98% 10mg GST融合蛋白阳性表达树脂电泳筛选试剂盒10
去甲基川陈皮素 HPLC≥98% 20mg GST融合蛋白阳性菌落鉴定试剂盒20
去甲乌药碱盐酸盐 HPLC≥98% 20mg GST融合蛋白因子10α(FACTORXa)酶切试剂盒10
去甲氧基姜黄素 HPLC≥98% 20mg guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去甲氧基醉椒素 HPLC≥98% 10mg guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
去甲异波尔定 HPLC≥98% 10mg guineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA试剂盒豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去甲泽拉木醛 HPLC≥98% 20mg H4-K4基100微克
去芹菜糖桔梗皂苷D HPLC≥90% 10mg H4-K4乙酰化100微克
去氢表雄酮 HPLC≥98% 20mg HA(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
丙酮酸激酶(PK)测试盒特供兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒 6-Amino-1-methyluracil 2434-53-9 中文名: 分子式:C5H7N3O2
兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISAKit 6-Amino-1,3-dimethyluracil 中文名: 分子式:C6H9N3O2 度:98.0%
兔子Ⅰ型胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil 中文名: 分子式:C5H6N4O3 度:98.0%
兔子Ⅰ型胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit 6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil 6972-78-7 中文名: 分子式:C5H6N4O3 度:98.0% 关键词:
兔子Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒 6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil 中文名: 分子式:C5H6N4O3
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
更新时间:2024/3/15 9:47:11
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