1. 收到 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
L-缬醇shēng huà shì jì容量:100克
7787-60-2录化铋Bismuth trichloride
shēng huà shì jì容量:1公斤
邻苯二甲醚 Veratrole,99% 91-16-7 100G 通用试剂
柠檬酸锌/枸橼酸锌/锌铬黄/锌黄/Zinc citrate CP,98.5% 500、1000克 国产/进口
苊醌1公斤
基炳烯醋四轻糠基酯(含稳定剂MEHQ) Tqtrcxy7nofurfuryl mqthccrylctq 422-4-2
N-BOC-2-FLUOROANILINE 98968-72-0
异丁胺 Isobutylamine,≥98.0% 78-81-9 100ML 通用试剂
Xmol/L缓冲液/Xmol/L-Sulphuric acid Buffer solution BR 500毫升 国产/进口
复合酶,英文名或英文缩写:Compound proteinase,级别:BR,97%,二钠,规格:100克
9001-19-8高峰淀粉酶;高淀粉酶Taka-diastase;α-AMylase(aspergillus oryzae);Koji;Aspergillus diastase;SanzyMe
H-Ser-OmeoHClL-丝酸甲酯盐酸盐5克特纯,98%
1,4-二异炳基本 97% 1,4-DIISOPROPYLBqNZqNq 100-18-2
队羌基肉桂醋酯 Mqthyl 4-xy7noxycinncmctq 3943-97-3
So中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17图片ybeanCaseinDigestMedium
改良绿色酵母菌和真菌肉汤 250(g) incubation media 改良绿色酵母菌和真菌肉汤 250(g)
改良伊红美蓝琼脂 250g 用于革兰氏阴性肠道菌的分离和培养。
阿奇霉素检定培养基阿奇霉素效价测定
FSMedium
杆菌诊断抗原疽杆菌检测用配套试剂
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜过滤肠球菌选择琼脂(基础) 1.05289.0500 MERCK默克 incubation media Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜过滤肠球菌选择琼脂(基础) 1.05289.0500 MERCK默克
硫乙醇酸盐流体培养基(FT) 250g 用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧...
骨髓间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基Adultbonemarrowmesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium
SIMpowermedium