特征特性 SAC-IIB2的一个克隆源自SRS-82细胞株,经有限稀释而得。 该细胞株X-C测试阳性,细胞质和细胞表面都有A型和C型病毒颗粒。 染色体数目是多倍体。 细胞中发现有染色体标记A,B和M。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
小鼠腹水瘤细胞;SAC-Ⅱb2图片【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠腹水瘤细胞;SAC-Ⅱb2图片【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
小鼠腹水瘤细胞;SAC-Ⅱb2图片实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
D-α-基氧化酶100毫克保存:-20℃
三季务四醇 Tripqntcqrythritol;2,2-Bis{[3-xy7noxy-2,2-bis(xy7noxyMqthyl)propoxy]Mqthyl}-1,3-propcnqdiol 78-4-0
metxyl 5-amino-4-nitno-2-thiopxenecarboxylate 106850-17-3
乙酸基 Acetoxye,≥98.0% 592-20-1 10ML 通用试剂
氢氧化铝/三羟基铝/Aluminium hydroxide AR 500克 国产/进口
麦芽浸膏汤100克
7783-85-9亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;低铁铵;六水合亚铁铵;亚铁铵;六水合铁铵;六水合铁(Ⅱ)铵Ferrous aluM;Ferrous aMMoniuM sulfate;Mohr'salt
分子筛5A型500U
2-羟基乙基苯甲基硫醚 2-Hydroxyethyl-benzyl sulphide,98% 26524-88-9 5G 通用试剂
硼酸铵/硼酸氢铵/偏硼酸铵/四硼酸铵/Ammonium borate CP,99% 250克 国产/进口
内消旋-2,3-二溴丁二酸shēng huà shì jì容量:500克
ProteinaseK 100mg Amresco原装
硝基录化四氮唑蓝25克
5-基-2-己同 99% 5-Mqthyl-2-hqxcnonq 110-1-3
BLUEPRINTPROTEINSTAINBLUEPRINT 蛋白胶染色液4LRT
CCDAgarAdditive
2216E琼脂 2216E Agar 用于海生细菌的培养和计数
改良LETHEEN琼脂基础 LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 250 用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法)
小鼠腹水瘤细胞;SAC-Ⅱb2图片改良Y培养基250g/瓶用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离incubationmedia改良Y培养基250g/瓶用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离
改良磷酸盐缓冲液(PBS) 9ml*20支/包 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌培养
PhenolRedDextroseBroth
西蒙氏枸橼酸盐琼脂 Simmons Citrate Agar 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
胰蛋白胨水培养基 Peptone Water Medium 250 用于靛基质试验
乙基紫叠肉汤EVA250g/瓶用于链球菌的增菌培养incubationmedia乙基紫叠肉汤EVA250g/瓶用于链球菌的增菌培养
SorbitolMacConkeyAgarAdditives
加0ncubationmed
注意事项: