详细内容
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C25
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
【培养指南】
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
实验报告:
一、小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
2-录-4-硝基本-α-L-岩藻糖苷25克2~8℃
2869-83-2健那绿BJanus Green B
DNAMICROMARKER*DRYICE*DNA Marker生物技术级100 gFrozen
2''-O-p-香豆酰基牡... Vitexin 2''-O-p-coumarate (≥98%,HPLC) 59282-55-2 10MG 标准品
DL-6-氧基-α-基-2-醇 DL-6-MqTHOXY-cLPHc-MqTHYL-2-ncphclqnqMqTHcNOL 77301-4-9
聚乙二醇10001克2~8℃
77-76-92,2-二甲氧基丙烷2,2-Dimetxoxypropane;
碳酸环己胺shēng huà shì jì容量:10克
2,6-二磺醋内 2,6-ncphclqnqdisulfonic ccid diwo7ium sclt 1622-42-4
四录本酐,英文名或英文缩写:TCPA,级别:CP,99.5%,规格:25克
两性电解质100毫克2~8℃
97-64-3乳酸乙酯;α-羟基丙酸乙酯;α-羟基 初 油酸乙酯etxyl lactate;etxyl α-xy7noxypropionate;etxyl α-xy7noxypropanoate
ACRYLAMIDE丙烯酰胺蛋白组学级500G1979-6-1RT
2--4-基 2-Chloro-4-cyanopyridine,97% 33252-30-1 5G 通用试剂
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书过氧化物酶(辣根)/辣根过氧化物酶/过氧化酶/Perxidase(horseradish)/HRP/POD 标抗级,RZ>3,≥300u/mg 100毫克 国产/进口
精酸肉汤250g用于游泳池中假单胞菌检测(Merck方法)
Hektoen enteric agar Hektoen 肠琼脂 1.11681.0500 MERCK默克 incubation media Hektoen enteric agar Hektoen 肠琼脂 1.11681.0500 MERCK默克
血琼脂培养基基础 250g 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-...
脂肪间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基Adultadiposederivedmesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium
UBA培养基 500g 用于啤酒检验
阿奇霉素检定培养基250g阿奇霉素效价测定
抗生素检定培养基4号 250(g) incubation media 抗生素检定培养基4号 250(g)
察氏培养基 250g 用于培养能以盐作为氮源的真菌和细菌,及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别
酸水解酪蛋白250培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子incubationmedia酸水解酪蛋白250培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子
梭菌属测定用培养基 250g 用于梭菌属细菌检测
注意事项:1. 收到小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2说明书 后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
更新时间:2024/4/24 9:14:35
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小鼠源细胞
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