详细内容
点击次数:1031 发布时间:2022/2/21 13:56:44
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)测试盒直销 | 50管/48样、100管/96样 | 微量法、紫外分光光度法 | GOY-01S6661 |
测定意义
丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate phosphate dikinase, PPDK, EC 2.7.9.1)是C4途径和景天科酸代谢途径的限速酶,催化ATP、丙酮酸和Pi经三步反应生成磷酸烯醇式丙酮酸。该酶主要存在于C4植物的叶绿体基质中,对光合功能具有重要调节作用。
测定原理:
PPDK的逆向反应催化磷酸烯醇式丙酮酸、AMP和PPi生成丙酮酸、ATP和Pi,乳酸脱氢酶进一步催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PPDK活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
禽流感H7N7病毒双重荧光PCR 检测试剂盒485,6-Dihydro-methylH-thieno[2,3-b]thiopyran-one14869
禽流感H9病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Dorzolomide 16932盐酸多佐胺
禽流感H9N1病毒双重荧光PCR 检测试剂盒48Isoprenaline 5盐酸异丙
禽流感H9N2病毒双重荧光PCR 检测试剂盒48Quetiapine fumarate1119742富马酸喹硫平
流感病毒N1型单重荧光PCR检测试剂盒48Pramipexole di46325盐酸普拉克索
盐酸氟哌噻吨 Flupenthixol di 质量规格:>99%,BR 人水蛭素(Hirudin)ELISA检测试剂盒HumanHirudinELISAKit 96T/48T
茶多酚;绿茶提取物 Tea polyphenol 质量规格:多酚含量≥98 人丝氨酸/苏氨酸蛋酸酶(STK)ELISA检测试剂盒Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 96T/48T
四氢姜黄素 Tetrahydrocurcumin 质量规格:HPLC≥98%,BR 人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA检测试剂盒Humanserineprotease,PRSSELISAKit 96T/48T
管花苷A(标准品) Tubuloside A 质量规格:HPLC≥98,标准品 人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA检测试剂盒Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 96T/48T
2’-乙酰基毛蕊花糖苷(标准品) 2'-Acetylacteoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA检测试剂盒Humaelaxin,RLNELISAKit 96T/48T
盐酸右美托咪定 Dexmedetomidine HCl 质量规格:≥99%,BR 人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)试剂盒 Human M2-PK ELISA Kit
地夫可特 Deflazacort 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 人酸激酶R型同工酶(R-PK)试剂盒 Human R-PK ELISA Kit
D-(-)-泛酰内酯 D-(-)-Pantolactone 质量规格:>99% 人酸脱氢酶E1(PDH E1)试剂盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit
盐酸丁咯地尔 Buflomedil HCl 质量规格:>99%,BR 人酸性0酸酶(ACP)ELISA检测试剂盒HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 96T/48T
盐酸丁咯地尔(标准品) Buflomedil HCl 质量规格:HPLC>99%,标准品 人酸性神经鞘0脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 96T/48T
丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)测试盒直销传染性胃肠炎病毒(PTGV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T Sitoste 1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 关键词: 苏里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
臭氧快速试剂盒 Ozone rapid reage kit 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S 度:98.0%
橙 1g Prerubialatin 1667718-89-9 中文名: 分子式:C27H20O7 度:% 关键词:
程序性死亡因子1 英文名称: programmed death 1 规格: 48T/96T 英文缩写: PD1 Periplocin 13137-64-9 中文名:杠柳毒苷 分子式:C36H56O13 度:98.5% 关键词:
成纤维细胞生长因子23 英文名称: Human Fibroblast Growth Factor 23 规格: 48T/96T 英文缩写: FGF-23 4-Acetamidophenol 103-90-2 中文名:对乙酰氨基酚 分子式:C8H9NO2
更新时间:2023/11/6 14:17:43
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