ATP-柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒说明书

详细内容

粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备：
培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

 【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

测定意义

ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的关键酶，其催化产生的乙酰辅酶A可用于脂肪酸合成和碳链延长、黄酮类物质合成、氨基酸合成等。

测定原理：

ACL在ATP和辅酶A存在的情况下催化柠檬酸裂解为乙酰辅酶A、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸盐。苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，计算ACL活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

操作步骤:
实验开始，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
Western及IP细胞裂解液0 ml2-C-Methyl-D-erythrono,4-lactone184651

X-gal溶液 mg/ml 5ml2-C-Methyl-D-erythritol5869872-C-甲基-D-赤藓糖醇

Zeocin 博来霉素1ml2-Chloromethyl-methyl-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine 127337-

α-萘乙酸溶液（α-NAA）5×1ml2-Chloro1-cyclopentylH-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin(11H)-one15211973

赤霉素溶液(GA3)5×1ml 2-Chloro-(5＇-(prop-ynyl),2＇-bithiophen-yl)ethanol11491
三(4,7-二苯基-1,10-菲绕啉酯)氯化钠钌（1mM 溶液）  Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II)  salt solution  质量规格：1mM，BC 小鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPTL2 ELISA Kit

胰蛋白酶原  Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas  质量规格：BC 小鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPTL3 ELISA Kit

色胺(>98%,BR)  Tryptamine  质量规格：>98%,BR 小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPTL4 ELISA Kit

三氧化钨(>99%,BC)  Tungsten (VI) oxide  质量规格：>99%,BC 小鼠血管生成素样蛋白7(ANGPTL7)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPTL7 ELISA Kit

碳化钨200(>99%,BC)  Tungsten carbide-200  质量规格：>99%,BC 小鼠血管生长素(ANG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

钨粉（200目）(>99.8%,BR)  Tungsten powder  质量规格：>99.8%,BR 小鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 ，英文名： ANG ELISA Kit

钨酸(>98%,BC)  Tungstic (VI) acid  质量规格：>98%,BC 小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒 ，英文名： BK ELISA Kit

震颤真菌(>98%,BC)  Verruculogen from Penicillium verruculosum  质量规格：>98%,BC 小鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒 ，英文名： VCAM1 ELISA Kit

羊毛脂  Wool fat  质量规格：BR 小鼠血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒 ，英文名： vWF ELISA Kit

5－－4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸钠盐  X-GLUC,  salt  质量规格：>98%,分子生物学 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA检测试剂盒MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T
ATP-柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒说明书兔粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名： 分子式：C18H27N3O4  度：98.0%  关键词： 

兔粒细胞集落刺激因子elisa试剂盒   兔粒细胞集落刺激因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔粒细胞集落刺激因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔粒细胞集落刺激因子试剂盒、兔粒细胞集落刺激因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：5-氨基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO3S 

兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式：C9H10N2S  度：98.0%  关键词： 

兔可溶性细胞间黏附分子1   英文名称：   Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   sICAM-1  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名：4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式：C17H14N2O2 

兔可溶性破骨细胞异化因子(rabbit RANKL)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Androstenediol  1156-92-9  中文名：4-雄烯二醇 分子式：C19H30O2

更新时间：2024/1/31 9:19:03

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