脂肪酸合成酶（FAS）测试盒说明书

详细内容

 【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

测定意义

细胞内脂质的积累是脂质合成与分解失衡的结果。脂肪酸合成增多，而氧化分解降低，会导致细胞内脂质积累。FAS是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

测定原理

以NADPH为还原力，FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成长链脂肪酸；通过测定NADPH的减少量，即可推算出FAS活性。

实验中所需仪器和用品

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。

粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备：
培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
操作步骤:
实验开始，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
5＇-Amino-Modifier C6, TFA-protected1gAcetylatractylodinol615829乙酰苍术素醇

6-Aminohexanol25gAtractylodin5523苍术素

PFP聚合物0 μLCrenulatin6262大花红天素

Sybr Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（× DMSO溶液）（PCR）0 uL1-Monopalmitin54241-棕榈酸单甘油酯

RTGreen（效果同EvaGreen）核酸染料（× 水溶液）0 μLMenisdaurin677658
氯化矮牵牛素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit大鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化芍药素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅠ,ColⅠELISA试剂盒大鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化芍药素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化芍药素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅡ,ColⅡELISA试剂盒大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化锦葵色素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化锦葵色素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅢ,ColⅢELISA试剂盒大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯化锦葵色素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

灵芝酸B HPLC≥98% 20mg RatCollageypeⅣ,ColⅣELISA试剂盒大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

灵芝酸C HPLC≥95% 20mg RatCompleme3,C3ELISAKit大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

灵芝酸C HPLC≥95% 20mg RatCompleme3,C3ELISA试剂盒大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
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更新时间：2024/3/12 9:23:50

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