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点击次数:1039 发布时间:2022/2/14 9:54:58
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒 | 50管/48样、100管/96样 | 微量法、紫外分光光度法 | GOY-01S6326 |
测定意义
MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理:
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
人Ⅰ型胶原α2(COL1α2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:COL1A2, OI4 Human COL1α2(Collagen Type Ⅰ Alpha 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组COL1α2浓度
夫定 Brivudine 质量规格:度≥99.0%,含量≥98.5% 茶叶维生素U(S-Methylmine)比色法定量检测试剂盒20
夫定(标准品) Brivudine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 差异相减杂交试剂盒10
卡巴他赛 Cabazitaxel 质量规格:≥99% 产气荚膜梭菌α(Closidiumperfringenscpa)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
米托蒽醌 Mitoxantrone 质量规格:HPLC>97%,BR 产气荚膜梭菌肠(Closidiumperfringenscpe)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
拉莫三嗪 Lamotrigine 质量规格:>98%,BR 肠产毒性(EerotoxigenicE.coli)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
拉莫三嗪 (标准品) Lamotrigine 质量规格:HPLC>98%,标准品 肠出血性大肠埃希菌(EerohaemorrhagicE.coli)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
D-半乳糖醛酸 D-Galacturonic acid 质量规格:进分,97%,一水 肠杆菌EE营养肉汤500毫升
D-半乳糖醛酸(标准品) D-Galacturonic acid 质量规格:UV法含量测定;一水物 肠集聚型大肠埃希菌(EeroaggregativeE.coli)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
骨化三醇 Calcitriol 质量规格:度≥98%,BR 肠侵袭性(EeroinvasiveE.coli)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
坎地沙坦酯 Candesartan cilexetil 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 肠胃活检螺旋杆菌(H.PYLORI)吉姆萨(GIEMSA)染色试剂盒50
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISAKit Phyllostine 27270-89-9 中文名: 分子式:C7H6O4
肌醇 25g Quetiapine 111974-69-7 中文名:喹硫平 分子式:C21H25N3O2S 度:98.0% 关键词:
活性氧 英文名称: Human Reactive Oxygen Species 规格: 48T/96T 英文缩写: ROS 4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 155405-80-4 中文名: 分子式:C16H16N4O3
活化蛋白C 英文名称: Activated protein C 英文缩写: APC 规格: 48T/96T Norandrostenedione 中文名:19-去甲-4-雄烯二酮 分子式:C18H24O2
磺酸 SHES 25g Pseudoprotodioscin 102115-79-7 中文名:伪原薯蓣皂苷 分子式:C51H82O21 度:98.0% 关键词: 细胞毒活性; 甾苷; 天门冬属; 薯蓣属; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
更新时间:2023/12/19 10:21:47
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