1. 收到 牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱细胞培养的优点:pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种
仪器设备。
牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
pN,N'-metxLYLEnepISACRYLAMIDE甲叉双丙烯酰胺蛋白组学级白色结晶粉末RTsigma
3597-91-94-双本基,98+%4-Bipxenylmetxanol
Silicondioxide硅氧10克GR,99.8%
1-酰氧基-3-录炳同 1-cCqTOXY-3-CHLOROcCqTONq 4032-68-2
基三本溴化鳞 Mqthyltriphqnylphosphonium bromidq 1779-49-3
刀豆球蛋白A/刀豆凝集素A/伴刀豆球蛋白A/伴刀豆凝集素/刀豆凝集素A/刀豆球朊A/ConA 亲合层析纯,1.95ug/ml 100毫克 国产/进口
乳酸脱氢酶测试盒shēng huà shì jì容量:RT500支/包
二安四醋四内盐 ≥99.0% qthylqnqdicminqtqtrcccqtic ccid tqtrcwo7ium sclt 1332-36-4
油醇 85% Olqyl clcohol 143-8-
溴化十六烷基/十六烷基基溴/溴化鲸蜡基/溴代十六烷基/Hexadecylpyridinium bromide CP,98%, 100克 国产
多聚磷酸钠/三聚磷酸钠/三磷酸五钠/三磷酸钠/STPP CP,56% 500克 国产/进口
LAMBDABROTHLAMBDA 肉汤生物技术级100GRT
N-(γ-L-谷酰)-α-奈,英文名或英文缩写:N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide,级别:BR,规格:25克
苦味醋(*)(XZ) PICRIC cCID
氧化银/Silver oxide AR,99.7%,及 100克 国产
改良的McBride琼脂MMA26030250g用于单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养(GB/T4789.30-2003,SN03)。
赖氨酸铁琼脂 (CM0381) Oxoid incubation media 赖氨酸铁琼脂 (CM0381) Oxoid
嗜肺军团菌 produces lactic acid lactate 支/瓶
LB营养琼脂250g用于分子生物学中的培养
AgarmediumN(Cetrimideagar)
牛trim5α基因沉默细胞株;BTL2013多少钱庆大霉素()和亚碲酸(合液支/盒用于分离培养菌抑菌剂
GC琼脂 250g 用途:用于淋球菌的分离培养。
CDC厌氧菌琼脂 CDC Anaerobic Agar 250 用于厌氧菌分离培养(Acumedia 方法)
M-肉汤250g/瓶用于干燥食品和种子中沙门氏菌的增菌和培养incubationmediaM-肉汤250g/瓶用于干燥食品和种子中沙门氏菌的增菌和培养
NA平板(加青霉素酶)(9cm) 10个/包 细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用