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人脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白

点击次数:150  发布时间:2023/12/20 15:57:23

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公司名称:上海谷研实业有限公司 型 号: 生产地址:中国大陆 已获点击:150 简单介绍: 人脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白公司正在出售的产品 通道活化蛋白酶2抗体 磷酸化白细胞介素-7受体a(CD127)抗体 先心病相关蛋白TBX1抗体 磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体 DNAJC25蛋白抗体 磷酸化FANCD2抗体 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4C抗体 溴化丙胺太林相关蛋白2抗体 TRIM62蛋白抗体 低密度脂蛋白受体抗体
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商品属性:
产品名称:人脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白 物种:Homo sapiens (Human,人) 英文名称:Active Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)PLA2G7; PAF-AH; PAFAH; Lp-PLA2; LDL-PLA2; Platelet Activating Factor Acetylhydrolase,Plasma; Phospholipase A2,Group VII; LDL-associated phospholipase A2; Phospholipase A2, Lipoprotein Associated 型号:GOY-01D3136 酶与激酶、代谢通路、感染免疫
物种:Homo sapiens (Human,人)
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:7.1
应用:Cellculture;ActivityAssays.
规格:10μg50μg200μg1mg5mg
重组蛋白有以下特点:
易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是,在表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工,常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。
表达载体在基因工程中具有十分重要的作用,原核表达载体通常为质粒,典型的表达载体应具有以下几种元件:
(1)选择标志的编码序列;
(2)可控转录的启动子;
(3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
(4)一个多限制酶切位点接头;
(5)宿主体内自主复制的序列。
 
公司正在销售的产品:
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重组蛋白操作步骤:
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目常用的获取基因的手段。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

更新时间:2024/1/19 9:52:00


标签:人脂蛋白关联磷脂酶A2   LpPLA2   活性蛋白   
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