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大鼠细胞色素P450家族成员21B(CYP21A2)重组蛋白

点击次数:96  发布时间:2023/12/8 16:33:30

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公司名称:上海谷研实业有限公司 型 号: 生产地址:中国大陆 已获点击:96 简单介绍: 大鼠细胞色素P450家族成员21B(CYP21A2)重组蛋白公司正在出售的产品 软骨中间层蛋白CILP抗体 单纯疱疹病毒1型转录调节因子ICP22抗体 甲基化CpG结合蛋白2抗体 肌氨酸脱氢酶抗体 膜蛋白CLDND1抗体 乙酰化自噬相关蛋白4B抗体  AF488标记小鼠抗人CD3单克隆抗体 膜二肽酶3抗体 半椎蛋白2抗体
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重组蛋白有以下特点:
易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是,在表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工,常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。
表达载体在基因工程中具有十分重要的作用,原核表达载体通常为质粒,典型的表达载体应具有以下几种元件:
(1)选择标志的编码序列;
(2)可控转录的启动子;
(3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
(4)一个多限制酶切位点接头;
(5)宿主体内自主复制的序列。
商品属性:
产品名称:大鼠细胞色素P450家族成员21B(CYP21A2)重组蛋白 物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名称:Recombinant Cytochrome P450 Family 21 Subfamily A Member 2 (CYP21A2)CYP21B; CPS1; CA21H; CAH1; CYP21; CYP21-B; 21-OHase; Cytochrome P450 21B; Steroid 21-hydroxylase; Cytochrome P450,Family 21,Subfamily A,Polypeptide 2 型号:GOY-01D2010 内分泌学、激素代谢
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::Endoplasmic reticulum membrane; Peripheral membrane protein. Microsome membra
预测分子量:28.6kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Asn200~Pro414 (Accession # Q64562) with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:8.8
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg50μg200μg1mg5mg
 
 
 
重组蛋白操作步骤:
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目常用的获取基因的手段。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
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更新时间:2024/3/15 9:47:13


标签:大鼠细胞色素P450家族成员21B   CYP21A2   重组蛋白   
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