注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Rengyol 93675-85-5 中文名:连翘环己醇 分子式:C8H16O3 度:97.5% 关键词: 连翘;
中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠促甲状腺素 英文名称: Mouse Thyroid Stimulating Hormone 规格: 48T/96T 英文缩写: TSH
Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4 度:98.0% 关键词: 千里光; 植物提取物; 天
小鼠噬酸性粒细胞趋化因子(mouse Eotaxin) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Chlorhexidine acetate 中文名:醋酸氯己定 分子式:C26H38Cl2N10O4
小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白elisa试剂盒 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒、小鼠嗜
鱼雌激素elisa试剂盒 鱼雌激素试剂盒 规格型号:96T/48T 鱼雌激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:鱼雌激素试剂盒、鱼雌激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 α-Spinasterol 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O
鱼雌二醇elisa试剂盒 鱼雌二醇试剂盒 规格型号:96T/48T 鱼雌二醇试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:鱼雌二醇试剂盒、鱼雌二醇eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 α-Spinasterol 481-18-5 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O 度:97.0% 关键词: 抗真菌; 栝楼; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
鱼补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 α-Spinasterol acetate 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2 度:96.0%
鱼补体3(C3)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 α-Spinasterol acetate 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2
鱼0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 ELISA. 96T/48T α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 关键词: 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
Dregeoside Da1 98665-65-7 中文名: 分子式:C42H70O15 Human thymic somal lymphopoietin (TSLP) ELISA Kit 人胸腺基质细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒
Dehydroadynerigenin digitaloside 52628-62-3 中文名: 分子式:C30H42O8 Humanalveolibasememembranezoneaibody,ABM-AbELISAKit 人抗肺泡基底膜抗体
呼吸道细菌多重PCR检测试剂盒使用方法:
一、样品 DNA 的制备 产品仅用于科研
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。