Western及IP细胞裂解液

详细内容

储存条件：冷藏（2-8℃）

概述

是一种在非变性条件下细胞裂解液。溶液的主要成分为Tris、NaCl、NP-40以及多种蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。组分为1倍溶液，可以处理10^7个细胞或100mg组织。

应用

可以用于SDS-PAGE、Western Blot和免疫沉淀（immunol precipitation，IP）。

组份

溶液A，溶液B，溶液C
N-Boc-O-Benzyl-D-serine  47173-80-8  中文名：N-Boc-O-苄基-D-丝氨酸 分子式：C15H21NO5  度：98.0%      小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒  

N-Benzylmaleimide  1631-26-1  中文名：N-苄基马来 分子式：C11H9NO2  度：98.0%      小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒           

N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  3483-82-7  中文名：N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯 分子式：C18H19NO4  度：98.0%      小鼠纤溶酶原激活剂抑制物-1(mouse PAI-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

N-Benzoyl-L-glutamic acid  6094-36-6  中文名：N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式：C12H13NO5  度：98.0%      小鼠血小板生长因子(mouse PDGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

N-Benzoyl-leucine  17966-67-5  中文名：N-苯甲酰基-亮氨酸 分子式：3  度：98.0%      小鼠血小板源生长因子-BB(mouse PDGF-BB)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
马尾柴酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)ELISA试剂盒 ，英文名： MGST1 ELISA Kit

喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg 兔合成酶(NOS)ELISA检测试剂盒Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T

愈创木素 HPLC≥98% 20mg 牛羧化不全骨钙素(ucOC)试剂盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit

黄独素D HPLC≥95% 20mg 英文名称HumanGlialCell-linederivedNeuroophicFactorELISAKit人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)规格：96T/48T

重楼皂苷VII HPLC≥95% 20mg 调料比色法定量检测试剂盒20

竹叶椒碱 HPLC≥95% 20mg RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISA试剂盒大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒规格：96T/48T

槐定碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠微粒体甘油三酸酯转运蛋白(MTTP)ELISA试剂盒 ，英文名： MTTP ELISA Kit

齿孔醇 HPLC≥95% 20mg 兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA检测试剂盒Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 96T/48T

桑辛素 C HPLC≥95% 20mg 牛双氢(DHT)试剂盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit

桑辛素 D HPLC≥95% 20mg 英文名称HumancalcitoningenerelatedpeptideELISAKit人降钙素基因相关肽(CGRP)规格：96T/48T
Western及IP细胞裂解液三氧化二铬(>99%，BR)  Chromium (III) oxide  质量规格：>99%，BR 高质化胶回收试剂盒20

四氧化三钴(>99%，BR)  Cobalt (II, III ) oxide  质量规格：>99%，BR 高质化聚烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒20

乙酸钴四水(>99.5%,BR)  Cobaltous acetate, tetrahydrate  质量规格：>99.5%,BR 高质型ECL化学发光显影试剂盒10

钴粉(>99%，BR)  Cobaltous powder  质量规格：>99%，BR 高质型ECL印迹化学发光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2

铜粉(>99.5%,BR)  Copper powder  质量规格：>99.5%,BR 革兰氏阳性细菌基因组DNA化试剂盒20

碱式碳酸铜(铜度：52.5~56.5%)  Copper(II) carbonate basic  质量规格：度(铜)：52.5~56.5% 革兰氏阳性细菌基因组DNA化试剂盒20

氧化铜粉(>99%,BR)  Copper(II) oxide  质量规格：>99%,BR 革兰氏阴性细菌基因组DNA化试剂盒20

焦磷铜  Copper(II) pyrophosphate  质量规格：(Cu):36.0~38.0%,Tech Grade 革兰氏阴性细菌基因组DNA化试剂盒20

铜三水(>98%,BR)  Copper(II) tartrate, trihydrate  质量规格：>98%,BR 谷氨酸待测样品处理试剂盒20

2＇-脱氧腺苷5＇二三钠盐(>97%,BR)  dADP  质量规格：>97%,BR 谷氨酰胺待测样品处理试剂盒20
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2023/12/21 16:15:28

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