详细内容
跨膜蛋白承担各种生物功能,膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
酵母膜蛋白提取试剂盒 | Yeast membrane protein extraction kit | 50T|100T |
酵母膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。酵母膜蛋白提取试剂盒可以从各种酵母样本中提取膜蛋白,可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各种下游实验。
储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点:
1.使用方便。
2.将蛋白提取的时间缩短至 1小时。
3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C22H17N3O4 度:98.0% 小鼠肺表面活性物质相关蛋白A 英文名称: Mouse Pulmonary surfacta associated protein type A 规格: 48T/96T 英文缩写: SP-A
Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C14H18N2O6 度:98.0% 小鼠肺表面活性物质相关蛋白D 英文名称: Mouse Pulmonary surfacta associated protein type D 规格: 48T/96T 英文缩写: SP-D
Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate 中文名:群勃龙环己甲基碳酸酯 分子式:C26H34O4 度:98.0% 小鼠S100钙结合蛋白A7 英文名称: Mouse S100 Calcium Binding Protein A7 规格: 48T/96T 英文缩写: S100A7
Ceftiofur 中文名:头孢噻呋盐酸盐 分子式:C19H18ClN5O7S3 度:98.0% 小鼠N-乙酰基-丝酰-天门冬酰-赖酰-脯酸(AcSDKP)ELISA试剂盒
Cefquinome 中文名:头孢喹咪 分子式:C23H24N6O5S2 度:98.0% 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒
乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Acetamide 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISA试剂盒小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 小鼠0脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)ELISA试剂盒 ,英文名: GPC4 ELISA Kit
癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) Bis(2-ethylhexyl) sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC) 人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA检测试剂盒HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit 96T/48T
1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 1,4-Butanediol 质量规格:standard for GC,≥99%(GC) 大鼠氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)试剂盒 Rat Peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA Kit
1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) (±)-1,2,4-Butanetriol 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 英文名称RatTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)规格:96T/48T
癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC) 钙ATP酶PMCA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl laurate 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) ELISAKitADP人脂联素规格:48T/96T
棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) Methyl palmitate 质量规格:Standard for GC,≥98.0%(GC) 小鼠0脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA试剂盒 ,英文名: GPC-3 ELISA Kit
水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl salicylate 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 大鼠大内皮素(BigET)ELISA检测试剂盒RatBigEndothelin,BigETELISAKit 96T/48T
油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC)) Methyl oleate 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 人丁酰胆碱酯酶(BCHE)试剂盒 Human Cholinesterase,BCHE ELISA kit
酵母膜蛋白提取试剂盒甲基原纤细薯蓣皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit小鼠钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒96T96T
桑黄酮G;桑根酮C HPLC≥98% 20mg MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISA试剂盒小鼠钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒96T96T
新莪术二酮 HPLC≥98% 5mg MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
B Purity≥98% 1mg MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA试剂盒小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
B Purity≥98% 1mg Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
G Purity≥98% 1mg Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA试剂盒小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
G Purity≥98% 1mg MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISA试剂盒小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
地黄苷C HPLC≥98% 10mg MouseLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
地黄苦苷 HPLC≥98% 10mg MouseLeukoieneC4,LT-C4ELISA试剂盒小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细叶远志苷B;远志糖苷B HPLC≥98% 10mg MouseLinkerforactivationofTcell,LATELISA试剂盒小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2023/12/8 10:34:32
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