详细内容
EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响小,可以较好的保存组织的某些酶类, 经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
EDTA脱钙液(pH7.2) | EDTA decalcifying solution, pH 7.2 | 100mL|500mL |
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
本品优点:
①经EDTA脱钙的组织染色结果好;
②对组织的结构损害小;
③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
本品缺点:
①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;
②脱钙后组织会稍微变硬。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羟甲基糠醛 分子式:C6H6O3 度:% 兔性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISAKit
Cerebroside B 中文名:脑苷酯B 分子式:C41H77NO9 度:97.0% 兔内皮细胞生长因子(VEGF)ELISAKit
4-Oxododecanedioic acid 中文名: 分子式:C12H20O5 度:95.0% 兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒
Rengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4 度:98.0% 兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒
Epirengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4 度:98.0% 兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
酸性红88 Acid Red 88 质量规格:AR,进分 人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA检测试剂盒Humaniduronatesulfatase,IDSELISAKit 96T/48T
酸性红183 Acid Red 183 质量规格:AR,原装进口 大鼠血管动蛋白(AMOT)试剂盒 Rat angiomotin,AMOT ELISA kit
酸性红9 Acid Red 9 质量规格:AR,进分 英文名称RatAmylinELISAKit大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
孔雀石绿 Malachite green 质量规格:BS 谷类氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20
灿烂绿,亮绿 Brilliant green 质量规格:BS 人胰腺癌标志物CA242ELISAKit人胰腺癌标志物CA242ELISAKit,48T/96T人胰腺癌标志物CA242ELISAKit,48T/96T规格:48T/96T
甲基绿 Methyl Green 质量规格:BS 小鼠碱性0酸酶(ALP)ELISA试剂盒 ,英文名: ALP ELISA Kit
茜素绿;酸性绿25 Alizarin green 质量规格:BS 大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit 96T/48T
萘酚绿B Naphthol Green B 质量规格:BS 人雌激素诱导蛋白PS2 试剂盒 Human Esogen-induced protein pS2 ELISA Kit
固绿FCF Fast Green FCF 质量规格:BS Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAKit大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒规格:96T/48T
子种绿A;蓝A Alphazurine A 质量规格:BS IGF蛋白共沉淀分析试剂盒5
EDTA脱钙液(pH7.2)二氯酞菁锡(IV) Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride 质量规格: 小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβ1 ELISA Kit
酞菁镁(II) Magnesium(II) Phthalocyanine 质量规格: 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-β1 ELISA Kit
酞菁锡(II) Tin(II) Phthalocyanine 质量规格: 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA检测试剂盒Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 96T/48T
酞菁二锂(>93.0%(N)) Dilithium Phthalocyanine 质量规格:>93.0%(N) 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβ2 ELISA Kit
4-氨基邻苯二甲腈(>98.0%(N)) 4-Aminophthalonitrile 质量规格:>98.0%(N) 小鼠转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-β2 ELISA Kit
4-叔丁基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N)) 4-tert-Butylphthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC)(N) 小鼠转化生长因子β3(TGFβ3)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβ3 ELISA Kit
4-丁氧基邻苯二甲腈(>95.0%(GC)) 4-Butoxyphthalonitrile 质量规格:>95.0%(GC) 小鼠转化生长因子β3(TGF-β3)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-β3 ELISA Kit
1,3-二亚氨基异吲哚啉(>98.0%(T)) 1,3-Diiminoisoindoline 质量规格:>98.0%(T) 小鼠转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβR1 ELISA Kit
4,5-二氯邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N)) 4,5-Dichlorophthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC)(N) 小鼠转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβR2 ELISA Kit
4-十二烷氧基邻苯二甲腈(>99.0%(GC)) 4-Dodecyloxyphthalonitrile 质量规格:>99.0%(GC) 小鼠转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβI ELISA Kit
更新时间:2023/12/26 9:24:20
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