详细内容
AEC底物显色试剂是一种可以通过过氧化物酶催化底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成红色不溶性产物,以此鉴定过氧化物酶活性,从而确定目标分子表达情况,该种方法权威而经典。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测(蛋白质免疫印记、免疫组织化学、以及原位杂交染色等)。产品性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
AEC显色试剂盒(20×) | AEC Peroxidase Substrate Kit,20× | 1ml|10ml |
试剂盒成分:
溶液 A浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
溶液 B浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
溶液 C浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
注意事项:
1. 由于AEC生成的颜色产物为脂溶性,因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,须用水性封片剂封片。
2. 根据情况自行优化实验条件,调整显色时间,获得佳显色效果。
3. AEC有一定毒性,操作时请采取必要的防护措施。
储存条件:2~8℃避光,有效期至少1年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 乙酰L-肉碱盐酸盐 100g
6-O-Methylcerevisterol 中文名: 分子式:C29H48O3 Acetyl-L-carnitinehydrochlorid
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 橙 1g
6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-对羟基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 AcridineOrange,hemi(zincchloride)salt 10g
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 乙肟 500ml
N甲基野靛碱 HPLC≥98% 20mg 10%蛋白电泳分离预制胶溶液500毫升
N去甲基荷叶碱 HPLC≥98% 20mg MouseCalcitonin,CTELISA试剂盒小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
OXi HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA试剂盒 ,英文名: PAFAH2 ELISA Kit
PinocembrinO(''galloyl'',''(S)hexahydroxydiphenoyl)βDglucose HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 96T/48T
RTA HPLC≥98% 10mg 犬白介素2(IL-2)试剂盒 Canine Ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit
S HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanAquaporin4ELISAKit人水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
SN HPLC≥98% 20mg 大鼠PGES基因甲基化检测试剂盒20
Tafluposide HPLC≥98% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Terameprocol HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子(PAF)ELISA试剂盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Tesetaxel HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA检测试剂盒rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
AEC显色试剂盒(20×)香紫苏醇 GC≥98% 20mg HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏二醇 GC≥98% 20mg HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏内酯 GC≥98% 20mg HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
消旋山莨菪碱 HPLC≥98% 20mg HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小白菊内酯 HPLC≥98% 20mg Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗胺 HPLC≥98% 20mg HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱 HPLC≥98% 20mg HumanpoiculinELISAKit 人膜桥蛋白(poiculin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱硫酸酯 HPLC≥98% 20mg HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗碱 HPLC≥98% 20mg Humanprealbumin,PAELISAKit 人白蛋白(PA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
更新时间:2024/2/19 10:25:21
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