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点击次数:1024 发布时间:2022/3/22 10:50:00
细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶等。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
广谱蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA,100X) | Broad-spectrum protease inhibitors mixtures(excluding EDTA, 100X) | 1ml |
应用域:
本产品适用于原代细胞,培养的哺乳动物细胞,动物组织,植物组织,酵母或细菌细胞等裂解物制备过程中蛋白的保护。
使用方法:
按 1:100 的比例加到适量的抽提试剂中,混匀,再进行样品蛋白的提取,或跟据实验目的,以及所培养的特定细胞和组织,通过实验进行摸索和优化。
注意事项:
1.传统的蛋白酶抑制剂(E-64, AEBSF, bestatin, leupeptin and aprotinin)是不能够抑制某些去泛素化(DUB)蛋白酶(例如 ATAXIN-3)的功能的。
2.本产品以 DMSO 为溶剂,操作时注意防护。
3.本产品使用室温平衡至溶解。
4.本产品使用需震荡,以保证各成分均匀。
保存:-20℃保存,12个月有效
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Amitriptyline 549-18-8 中文名:盐酸阿米替林 分子式:C20H24ClN 0酸化SMAD2/3抗体 英文名称: Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody 规格: 48T/96T 英文缩写: PSMAD2/3 Ab
2-Aminophenyl phenyl sulfone 4273-98-7 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S 0酸化核因子κB 英文名称: Human phosphor-Nuclear Factor kappa B 规格: 48T/96T 英文缩写: pNFκB
8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-28-8 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S 羧酸酯酶(CarE)测试盒 可见分光光度法 50管/48样
2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒 可见分光光度法 25管/24样
2-Amino-5-nitrobenzophe 1775-95-7 中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式:C13H10N2O3 线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒 可见分光光度法 25管/24样
3,5-二-L-酪氨酸 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate 质量规格:>98%,BR 人鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA检测试剂盒Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit 96T/48T
氟氯西林钠(标准品) Flucloxacillin 质量规格:含量测定,标准品 大鼠胃动素(MTL)试剂盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit
巴利森苷A;派立辛 Parishin A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatCyclinD2ELISAKit大鼠细胞周期素D2(CyclinD2)规格:96T/48T
山楂酸,马斯里酸 Maslinic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA分析试剂盒48/96
2-并咪唑-5-磺酸,紫外线吸收剂 UV-T 2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid 质量规格:>98% ELISAKitTM人血栓调节蛋白规格:48T/96T
毛萼乙素 Eriocalyxin B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠缓激肽(BK)ELISA试剂盒 ,英文名: BK ELISA Kit
知母皂苷元 Sarsasapogenin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA检测试剂盒Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 96T/48T
4'-去甲鬼臼 4'-Demethylpodophyllotoxin 质量规格:标准品,用于含量测定 大鼠维生素K1(VK1)试剂盒 Rat Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
杠柳毒苷 Periplocin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatCyclinD1ELISAKit大鼠细胞周期素D1(CyclinD1)规格:96T/48T
1,2-二亚油酰甘油 1,2-Dilinoleoylglycerol 质量规格:美国进口原装 核酸氧化8-氧鸟苷(8-oxo-G)ELISA分析试剂盒48/96
广谱蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA,100X)潮霉素B(罗氏原装) Hygromycin B 质量规格:罗氏原装,浓度50mg/ml 大鼠血红素氧合酶2(HO-2)试剂盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit
芹菜苷; 芹黄苷 Apiin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA检测试剂盒Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T
柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野决明苷 Chrysoeriol 7-O-glucoside 质量规格:HPLC≥97%,标准品 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
山柰酚-3-O-芸香糖苷(标准品) Kaempferol-3-O-rutinoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠血清(NO)ELISA检测试剂盒Ratniicoxide,NOELISAKit 96T/48T
泮托拉唑钠一水物 Panrazole 质量规格:>98%,BR 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA检测试剂盒RatSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T
泮托拉唑钠(标准品) Panrazole 质量规格:含量测定,一水物 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)试剂盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
盐酸法舒地尔 Fasudil 质量规格:>99%,BR 大鼠血清素(5-羟色胺)-N-乙酰基转移酶(AANAT)试剂盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit
盐酸法舒地尔(标准品) Fasudil 质量规格:HPLC>98%,标准品 大鼠血清素受体2A/5-羟色胺受体2A(5-HT-2A)试剂盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit
草质素苷(标准品) Rhodionin 质量规格:HPLC≥95%,标准品 大鼠血清总补体(CH50)ELISA检测试剂盒Rat50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T
红景天素;草质素甙; Rhodiosin 质量规格:HPLC≥88%,标准品 大鼠血栓体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
更新时间:2023/12/7 10:36:01
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