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和铁转铁蛋白(holo transferrin)持续地释放铁离子,并形成脱铁转铁蛋白(apo transferrin)。研究表明,饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是有效的形态。对于杂交瘤,黏连细胞和悬浮细胞系,在细胞培养过程中,应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系,需要选择合适的浓度。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
牛饱和铁转铁蛋白 | Bovine Transferrin, HOLO | 100mg|1g |
Bovine Transferrin(牛转铁蛋白)是一种广泛使用的生物可利用铁来源,细胞和组织培养中重要的促生长营养物。采用新西兰来源的牛血浆,利用亲和色谱层析技术制备而得,保证了产品的高纯度、蛋白完整性、无辛酸残留及提取过程无热或溶剂引起的变性效应,符合ISO质量体系,确保了高质素的产品安全标准。
Bovine Transferrin(牛转铁蛋白)以高纯度、热处理、冻干粉状态提供,并有脱铁(apo)或饱和铁(holo)两种形式。
转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下,使用之再溶解。一般用PBS或者纯水在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液,浓度为2 mg/ml,然后用无菌滤膜进行过滤,滤液可在无菌条件下4℃保存5-10天。
英文别名:Serum transferrin; beta-1-Metal-combining protein; Siderophilin
来源:牛血浆
含铁量:不少于1000 ppm
分子量:约76,000-81,000
外观:浅红色冻干粉
纯度:≥95%(w/w总蛋白)
溶解性:溶于水(10 mg/ml),在20-25℃完全溶解约20min
储存条件:4℃
Benzoyl-DL-mine 4703-38-2 中文名:苯甲酰基-DL-蛋氨酸 分子式:C12H15NO3S 二氢二醇脱氢酶 英文名称: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 规格: 48T/96T 英文缩写: DDH2
Bindone 1707-95-5 中文名:双茚二酮 分子式:C18H10O3 多巴胺 英文名称: Human Dopamine 规格: 48T/96T 英文缩写: DPN
Benzyl carbazate 5331-43-1 中文名:肼基甲酸苄酯 分子式:C8H10N2O2 强啡肽 英文名称: Human Dynorphin 规格: 48T/96T 英文缩写: DYN
5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名:5-苯甲酰基戊酸 分子式:C12H14O3 鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
7-Benzyloxyindole 20289-27-4 中文名:7-苄氧基吲哚 分子式:C15H13NO 鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒 48T
腐植酸,腐殖酸 Humic acid 质量规格:>90%,BR Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
光萼野百合碱(标准品) Usaramine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 载玻片细胞PAR-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
L-天门冬氨酸钠盐 L-Aspartic acid salt 质量规格:>99%,BR MonkeyHyaluronicacid,HAELISA试剂盒猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
花旗松素,二氢槲皮素 Taxifolin 质量规格:>98% 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 ,英文名: TNFsR-Ⅱ ELISA Kit
花旗松素,二氢槲皮素(标准品) Taxifolin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
芦荟大黄素 Aloeemodin 质量规格:>96%,BR 人抗IgA抗体(ai-IgA-Ab)试剂盒 Human ai-IgA aibody ELISA Kit
芦荟大黄素(标准品) Aloeemodin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit大鼠8异列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞色素C(马源) Cytochrome C 质量规格:>95%,BR,来源马心 载玻片细胞PAR-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
细胞色素C(牛源) Cytochrome C 质量规格:>95%,BR,来源牛心 MonkeyInsulin,INSELISA试剂盒猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞色素C(猪源) Cytochrome C 质量规格:>95%,BR,来源猪心 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 ,英文名: TNFsR-Ⅰ ELISA Kit
牛饱和铁转铁蛋白苍山香茶菜素 HPLC≥98% 5mg P53(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
长春碱衍生物 HPLC≥98% 5mg PA317包装细胞克隆选择培养基500毫升
长管贝壳杉素 E HPLC≥98% 5mg pADEASY-pSHTLE+目的基因腺病毒
长管假素D HPLC≥98% 5mg Pan-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6
长管假素E HPLC≥98% 5mg PAR-1(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
长寿花糖甙 HPLC≥98% 5mg PAR-1蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
柽柳黄素 HPLC≥98% 5mg PAR-1蛋白共沉淀分析试剂盒5
橙黄胡椒酰胺乙酸酯 HPLC≥98% 5mg PAR-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
橙皮内酯水合物 HPLC≥98% 5mg PAR-2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
赤麻木脂素 HPLC≥98% 5mg PAR-2蛋白共沉淀分析试剂盒5
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2024/3/7 10:09:59
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