详细内容
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究(本试剂盒包含兔抗p35抗体),但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
p35蛋白检测试剂盒 | p35 Detection Assay(Western Blot) | 50T |
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate 24922-02-9 中文名: 分子式:C8H12O3 HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA试剂盒人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Mecobalamin 13422-55-4 中文名:甲钴胺 分子式:C63H91CoN13O14P 组织HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性检测试剂盒20次
Terbinafine 78628-80-5 中文名:盐酸特比萘芬 分子式:C21H26ClN HumanPlatelet-DerivedGrowthFactor-BB,PDGF-BBELISAKit人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Domperidone 57808-66-9 中文名:多潘立酮 分子式:C22H24ClN5O2 兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S Rat vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 大鼠内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒
硝酸奥昔康唑(标准品) Oxiconazole Nitrate 质量规格:HPLC法含量测定 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA检测试剂盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T
普瑞巴林(标准品) Pregabalin 质量规格:HPLC法含量测定 人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)试剂盒 Human IL-2sRα ELISA Kit
(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林杂质)(标准品) [(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity) 质量规格:供检查用 英文名称MouseTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)规格:96T/48T
山梨醇(标准品) D-Sorbitol 质量规格:供检查用 PARP蛋白共沉淀分析试剂盒5
乙二醇(标准品) Ethylene Glycol 质量规格:供检查用 Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISA试剂盒猪血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
降二氢辣椒碱 Nordihydrocapsaicin 质量规格:HPLC≥95%,标准品 小鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒 ,英文名: GAPDH ELISA Kit
4-甲氨基安替比林(标准品) 4-(Methylamino)-antipyrine 质量规格:供检查用 人肺耐药蛋白(LRP)ELISA检测试剂盒HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 96T/48T
硫酸肼(标准品) Hydrazine sulfate 质量规格:供TLC法系统适用性试验用 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)试剂盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit
硫酸肼(标准品) Hydrazine sulfate 质量规格:供检查用 英文名称RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX规格:96T/48T
环扁桃酯(标准品) Cyclandelate 质量规格:HPLC法含量测定 活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位染色试剂盒(超氧阴离子)100
p35蛋白检测试剂盒N-硝基-L-精氨酸甲酯 N'-Nitro-L-arginine-methyl ester 质量规格:>98% 人不对称二甲基精氨酸(ADMA)试剂盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE) N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester 质量规格:>98% 人不透光相关蛋白(OPAs)ELISA检测试剂盒HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 96T/48T
AEBSF丝氨酸抑制剂 AEBSF HCl 质量规格:>98%,BR 人布卢姆综合征蛋白(BLM)试剂盒 Human BLM ELISA Kit
AEBSF(进分) AEBSF HCl 质量规格:>97%,进分TCI A2215 人菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)试剂盒 Human Brucella Aibody IgG,Brucella Ab IgG ELISA Kit
盐酸贝他定(进口) Bestatin HCl 质量规格:≥98%,美国进口 人层连蛋白/板层素(LN)试剂盒 Human Laminin,LN ELISA KIT
邻菲啰啉盐酸盐,一水 1,10-Phenanthroline monohydrate 质量规格:>99% 人层粘连蛋白-5(LN-5)试剂盒 Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit
膦酰二肽钠 Phosphoramidon di salt 质量规格:0.99 人层粘连蛋白β1(LN-β1)试剂盒 Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 Decyl β-D-glucopyranoside 质量规格:>98%,BR 人层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)试剂盒 Human LAMC2 ELISA Kit
德罗特韦(GSK-1349572,DTG) Dolutegravir,GSK1349572 质量规格:>98%,BR 人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)试剂盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit
十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖 Dodecyl glucopyranoside 质量规格:>99%,BR 人肠三叶因子(ITF)试剂盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit
更新时间:2024/2/20 9:16:06
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