10×WB洗涤液(PBS)

详细内容

WB洗涤液可以用于Western Blot时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景，增强信噪比。

使用说明

1. 取适量10×WB 洗涤液，用去离子水10 倍稀释。在一抗或二抗孵育结束后，加入适量的WB 洗涤液，使之能盖住杂交膜，在摇床上缓慢摇动洗涤10-15 分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的WB 洗涤液。共洗涤3 次，每次10-15 分钟。然后进行后续的操作。

2. 如果按照上述洗涤条件,WB 的染色结果背景仍然较高，可以适当延长洗涤时间，并增加洗涤次数。通常，延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB 的结果产生负面影响。

注意事项

1. WB洗涤液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存：RT，有效期12个月。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  217810-46-3  中文名： 分子式：C18H26O4    Rat thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 大鼠血栓体蛋白(TpP)ELISA试剂盒

11-Hydroxyjasmonic acid  140447-14-9  中文名： 分子式：C12H18O4    Humanai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 人抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Soyacerebroside II  115074-93-6  中文名：大豆脑苷II  分子式：C40H75NO9    humandihydropyrimidinase-like3,DPYSL3ELISA试剂盒人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Sucrose  57-50-1  中文名： 分子式：C12H22O11    组织MUSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

5-Hydroxymethylfurfural  67-47-0  中文名：5-羟甲基糠醛 分子式：C6H6O3    Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA试剂盒规格：96T/48T
玉米烯酮(>98% (HPLC),BC)  Zearale from Giberella zeae  质量规格：>98% (HPLC),BC 英文名称RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)规格：96T/48T

碱式碳酸锌  Zinc carbonate basic  质量规格：BR 简单细菌酚品红染色试剂盒50

硬脂酸锌  Zinc distearate  质量规格：BR ELISAKitVK1人维生素K1规格：48T/96T

氢氧化锌(>98%,BR)  Zinc hydroxide  质量规格：>98%,BR 小鼠二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)ELISA试剂盒 ，英文名： DLAT ELISA Kit

化锌(>98%,BC)  Zinc iodide  质量规格：>98%,BC 人复制蛋白A(RPA-70)ELISA检测试剂盒HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 96T/48T

锌四水(>98%,BR)  Zinc phosphate tetrahydrate  质量规格：>98%,BR 大鼠列腺素F2α受体(PTGFR)试剂盒 Rat Prostaglandin F2-alpha receptor,PTGFR ELISA kit

硫化锌(>98%, Ind Grade)  Zinc sulfide  质量规格：>98%, Ind Grade 英文名称RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)规格：96T/48T

氧化锆(>98%,BC)  Zirconium (IV) oxide  质量规格：>98%,BC 简单细菌甲基蓝染色试剂盒50

氯氧化锆八水(>98%,BC)  Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate  质量规格：>98%,BC ELISAKitVE人维生素E规格：48T/96T

氢氧化锆  Zirconium hydroxide hydrate  质量规格：BR 小鼠二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)ELISA试剂盒 ，英文名： DLD ELISA Kit
10×WB洗涤液(PBS)ENTβH贝壳杉烷,二羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA试剂盒小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

豨莶醚酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

entα二羟基贝壳杉烷羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinlipase,LPLELISA试剂盒小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

enta,,三羟基贝壳杉烷羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五味子酮 HPLC≥98% 10mg Mouselipoproteinα,Lp-αELISA试剂盒小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苦豆碱 HPLC≥98% 20mg MouseL-phenylalanine,LPAELISA试剂盒小鼠苯氨酸(LPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

番石榴苷 HPLC≥98% 20mg MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

牛扁碱 HPLC≥98% 20mg MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA试剂盒小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

绞股蓝皂苷XLVI HPLC≥97% 20mg MouseL-SelectinELISAKit小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒规格：96T/48T

金盏花苷E;去葡萄糖竹节参皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseL-SelectinELISA试剂盒小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒规格：96T/48T

更新时间：2024/4/19 9:58:09

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