中pH缓冲液套装

详细内容

Native-PAGE，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是目电泳法分离非变性蛋白质的主要方法，实验过程杜绝变性剂接触目的蛋白质，常用于同工酶的鉴定和提纯。本产品可快速制备分离胶，不含SDS，并确保配制分离胶的精确pH值。

储存条件：常温运输及保存(5×中pH上样液需要-20℃保存)，有效期为一年。

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目电泳法分离活性蛋白的主要方法，跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同，它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同，所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐，为此本公司开发了本产品。

产品特点：

1．即开即用，不需单独准备各种成分，十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺

2．非变性，电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用，得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。

3．可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。

4．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

5．提供具有3种不同pH的缓冲液套装，便于客户选择适合的缓冲液体系。

储存条件：常温运输和保存(上样液需-20℃保存)，保存期为一年。

使用方法：

如何选择缓冲液

高pH浓缩胶，高pH分离胶，高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液，电泳液，配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要，缓冲液的佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI，则蛋白质分子带电多(电荷密度大)，电泳速度快，分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性，失去活性，所以佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡，需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定，没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5，所以在不知道目标蛋白的pI时，可以先选用高pH缓冲系统。
盐酸氟哌噻吨  Flupenthixol di  质量规格：>99%,BR 人水蛭素(Hirudin)ELISA检测试剂盒HumanHirudinELISAKit 96T/48T

茶多酚;绿茶提取物  Tea polyphenol  质量规格：多酚含量≥98 人丝氨酸/苏氨酸蛋酸酶(STK)ELISA检测试剂盒Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 96T/48T

四氢姜黄素   Tetrahydrocurcumin  质量规格：HPLC≥98%,BR 人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA检测试剂盒Humanserineprotease,PRSSELISAKit 96T/48T

管花苷A(标准品)  Tubuloside A  质量规格：HPLC≥98,标准品 人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA检测试剂盒Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 96T/48T

2’-乙酰基毛蕊花糖苷(标准品)  2＇-Acetylacteoside  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA检测试剂盒Humaelaxin,RLNELISAKit 96T/48T

盐酸右美托咪定  Dexmedetomidine HCl  质量规格：≥99%,BR 人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)试剂盒 Human M2-PK ELISA Kit

地夫可特  Deflazacort  质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养 人酸激酶R型同工酶(R-PK)试剂盒 Human R-PK ELISA Kit

D-(-)-泛酰内酯   D-(-)-Pantolactone  质量规格：>99% 人酸脱氢酶E1(PDH E1)试剂盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit

盐酸丁咯地尔   Buflomedil HCl  质量规格：>99%,BR 人酸性0酸酶(ACP)ELISA检测试剂盒HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 96T/48T

盐酸丁咯地尔(标准品)  Buflomedil HCl  质量规格：HPLC>99%,标准品 人酸性神经鞘0脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 96T/48T
人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA检测试剂盒HumanAquaporin3,AQP-3 96T/48T Corylifol A(标准品)  Corylifol A  质量规格：HPLC≥98,标准品

人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA检测试剂盒HumanAquaporin4,AQP-4 96T/48T 芬酸钠  Bromfenac   质量规格：>98%,BR

人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA检测试剂盒HumanAquaporin5,AQP-5 96T/48T 芬酸钠(标准品)  Bromfenac   质量规格：HPLC≥99,标准品

人水蛭素(Hirudin)ELISA检测试剂盒HumanHirudin 96T/48T 盐酸氟哌噻吨  Flupenthixol di  质量规格：>99%,BR

人丝氨酸/苏氨酸蛋酸酶(STK)ELISA检测试剂盒Humanserine/threonineproteinkinase,STK 96T/48T 茶多酚;绿茶提取物  Tea polyphenol  质量规格：多酚含量≥98

人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA检测试剂盒Humanserineprotease,PRSS 96T/48T 四氢姜黄素   Tetrahydrocurcumin  质量规格：HPLC≥98%,BR

人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA检测试剂盒Humanfilameoushemagglinin,FHA 96T/48T 管花苷A(标准品)  Tubuloside A  质量规格：HPLC≥98,标准品

人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA检测试剂盒Humaelaxin,RLN 96T/48T 2’-乙酰基毛蕊花糖苷(标准品)  2＇-Acetylacteoside  质量规格：HPLC≥98%,标准品

人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)试剂盒 Human M2-PK ELISA Kit 盐酸右美托咪定  Dexmedetomidine HCl  质量规格：≥99%,BR

人酸激酶R型同工酶(R-PK)试剂盒 Human R-PK ELISA Kit 地夫可特  Deflazacort  质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
中pH缓冲液套装饮料氟元素比色法定量检测试剂盒20 盐酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg

Mouseleoopichormone,LHELISAKit小鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸巴马汀 HPLC≥98% 20mg

小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 ，英文名： PI ELISA Kit 盐酸白屈菜红碱 HPLC≥98% 20mg

小鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA检测试剂盒MouseThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 96T/48T 盐酸吡格列酮 HPLC≥98% 20mg

人假定蛋白LOC677168 试剂盒 human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit 盐酸川芎嗪 HPLC≥98% 20mg

RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸黄柏碱 HPLC≥98% 20mg

组蛋白H3-T450酸化检测试剂盒10/20等 盐酸黄连碱 HPLC≥98% 20mg

Mouseai-thrombieceptor,AELISA试剂盒小鼠抗凝血酶受体(A)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸罗格列酮 HPLC≥98% 20mg

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP7 ELISA Kit 盐酸青藤碱 HPLC≥98% 20mg

兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA检测试剂盒RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit 96T/48T 盐酸去氢骆驼蓬碱 HPLC≥98% 20mg
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2023/12/28 9:23:34

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