细胞与组织裂解液(一氧化氮检测用)

详细内容

本品是一种门用于一氧化氮或总一氧化氮检测的细胞与组织裂解液。使用本裂解液裂解的样品，可以用于百奥莱博的一氧化氮检测试剂盒(YT286)、总一氧化氮检测试剂盒(YT287)的检测。

本裂解液裂解获得的样品中包含了细胞或组织样品中的大部分蛋白，可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036/YT037)测定蛋白浓度，并可以用于SDS-PAGE和Western印迹检测。需要注意的是本裂解液中不含蛋白酶和磷酸酯酶的抑制剂。本裂解液中添加蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂可能会干扰后续的一氧化氮检测。

本裂解液可以耐受反复冻融。本裂解液如果用于培养于六孔板中一个孔的细胞的裂解，或者用于20mg组织的裂解液，约可以裂解500-1000个样品。

储存条件：-20℃，有效期一年。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
杨梅醇 HPLC≥98% 5mg Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

杨梅酮 HPLC≥98% 5mg RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

洋椿苦素 HPLC≥98% 5mg RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

洋紫苏醇B HPLC≥98% 5mg RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T

野甘草属醇 HPLC≥98% 5mg RabbitvonWillebrandFactor,VWFELISAKit兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

野黑樱苷 HPLC≥98% 20mg Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

野黑樱苷 HPLC≥98% 5mg Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

叶含乙酰瘿花香茶菜素 A HPLC≥98% 5mg Rac1鸟苷酸酶活性分析试剂盒6

叶含乙酰瘿花香茶菜素 B HPLC≥98% 5mg Rac2鸟苷酸酶活性分析试剂盒6

叶下珠脂素 HPLC≥98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
rabbitTumornecrosisfactorα,TNFα兔子坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐肤木内酯 A HPLC≥98% 5mg

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPA兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 杨梅醇 HPLC≥98% 5mg

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPAR兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T 杨梅酮 HPLC≥98% 5mg

RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGF兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 洋椿苦素 HPLC≥98% 5mg

RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T 洋紫苏醇B HPLC≥98% 5mg

RabbitvonWillebrandFactor,VWF兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 野甘草属醇 HPLC≥98% 5mg

Rabbitα2-Aiplasmin,α2-AP兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 野黑樱苷 HPLC≥98% 20mg

Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TG兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 野黑樱苷 HPLC≥98% 5mg

Rac1鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 叶含乙酰瘿花香茶菜素 A HPLC≥98% 5mg

Rac2鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 叶含乙酰瘿花香茶菜素 B HPLC≥98% 5mg
细胞与组织裂解液(一氧化氮检测用)人解整合素样金属蛋白酶12(ADAM12)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit 山梨酸 HPLC≥99% 250mg

ratai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山麦冬皂苷B HPLC≥95% 20mg

组蛋白H2B-K16乙酰化检测试剂盒10/20等 山羊豆碱 HPLC≥98% 20mg

MouseAndrostenedione,ASDELISA试剂盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山楂酸 HPLC≥98% 20mg

小鼠游离状腺原酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit 山栀苷 HPLC≥98% 20mg

小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Mousemyeloperoxidase-aineuophilcylasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T 山栀苷甲酯 HPLC≥98% 20mg

人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit 山栀子苷B HPLC≥98% 20mg

Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山茱萸苷 HPLC≥98% 20mg

组蛋白H2B-K46甲基化(di)检测试剂盒10/20等 山茱萸新苷 HPLC≥98% 20mg

MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISA试剂盒小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山竹子素 HPLC≥95% 20mg

更新时间：2024/4/12 10:05:55

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