His标签蛋白纯化试剂盒(还原剂和螯合剂耐受型)

详细内容

试剂盒是一种采用了新型的GoldBalb His-tag Purification Resin的可以兼容还原剂和螯合剂，并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的试剂盒。试剂盒提供了His标签蛋白所需的相关试剂和亲和层析柱空柱管（10套×3mL），为His标签蛋白的纯化带来了大的便利。一个包装的本产品足够进行10次His标签重组蛋白纯化，每次细菌沉淀的湿重约为1克。每次蛋白的大纯化量为10～15mg，具体的大纯化量和蛋白分子量有关；对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白，每次的蛋白

蛋白样品溶液通过GoldBalb His-tag Purification Resin时，重组蛋白His标签上的组氨酸残基能特异性地结合到GoldBalb His-tag Purification Resin中的镍离子上，其它蛋白则不能被结合。洗涤后，His标签重组蛋白可在非变性条件下被洗脱，从而被分离纯化。

GoldBalb His-tag Purification Resin对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大，可以获得高纯度的His标签重组蛋白，可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。

GoldBalb His-tag Purification Resin采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质，并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术，和目市售的大多数Ni-NTA agarose或类似产品相比，非特异性蛋白结合显著降低，耐受压力强，镍离子螯合非常稳定。和同类产品相比，本产品由于镍离子基本不会流失，重复使用本纯化介质时不需要重新装载镍离子。

Ni-NTA agarose以及绝大多数类似的镍柱产品不能耐受蛋白样品中常见浓度的还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等以及常见浓度的螯合剂如EDTA等，但GoldBalb His-tag Purification Resin可以很好地耐受DTT等还原剂以及EDTA等螯合剂。本产品可耐受20mMDTT等还原剂，以及20mMEDTA等螯合剂。这为需要添加还原剂或螯合剂的蛋白样品的纯化提供了可能性。本产品不兼容8M尿素和6M盐酸胍。对于包涵体蛋白的纯化，在采用8M尿素或6M盐酸胍溶解蛋白的情况下，需要通过透析去除尿素和盐酸胍后才能使用本产品进行His标签蛋白的纯化。

保存条件：4℃保存，至少一年有效。除GoldBalb His-tag Purification Resin外，其余均可以-20℃保存。
杨梅苷(标准品)  Myricetrin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF9 ELISA Kit

杨芽黄素(标准品)  Tectochrysin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)ELISA试剂盒 ，英文名： Alk-Smase ELISA Kit

洋川芎内酯A（标准品）  Senkyunolide A  质量规格：鉴别用，标准品 小鼠腱蛋白样蛋白2(CHRDL2)ELISA试剂盒 ，英文名： CHRDL2 ELISA Kit

氧化槐果碱（标准品）  Oxysophocarpine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 ，英文名： CT ELISA Kit

Belinostat  Belinostat (PXD101)  质量规格：>98% 小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

氧化胡素(标准品)  Oxypeucedanin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 ，英文名： CGRP ELISA Kit

野百合碱（标准品）  Crotaline;Monocrotaline  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠降钙素受体(C)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

野黄芩苷(标准品）  Scutellarin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠降钙素原(PCT)ELISA检测试剂盒MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T

野黄芩素(标准品)  Scutellarein  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠降钙素原(PCT)ELISA试剂盒 ，英文名： PCT ELISA Kit

8-O-乙酰山栀苷甲酯（标准品）  8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠交联物(PY)ELISA试剂盒 ，英文名： PY ELISA Kit
小鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 盐酸甜菜碱（标准品）  Betaine   质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA检测试剂盒Mousebasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6 96T/48T 盐酸小檗胺（标准品）  Berbamine   质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA检测试剂盒Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9 96T/48T 盐酸益母草碱(标准品)  Leonurine   质量规格：HPLC≥98%,标准品

小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF9 ELISA Kit 杨梅苷(标准品)  Myricetrin  质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)ELISA试剂盒 ，英文名： Alk-Smase ELISA Kit 杨芽黄素(标准品)  Tectochrysin  质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠腱蛋白样蛋白2(CHRDL2)ELISA试剂盒 ，英文名： CHRDL2 ELISA Kit 洋川芎内酯A（标准品）  Senkyunolide A  质量规格：鉴别用，标准品

小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 ，英文名： CT ELISA Kit 氧化槐果碱（标准品）  Oxysophocarpine  质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Belinostat  Belinostat (PXD101)  质量规格：>98%

小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 ，英文名： CGRP ELISA Kit 氧化胡素(标准品)  Oxypeucedanin  质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠降钙素受体(C)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 野百合碱（标准品）  Crotaline;Monocrotaline  质量规格：HPLC≥98%，标准品
His标签蛋白纯化试剂盒(还原剂和螯合剂耐受型)化线粒体形态/活性荧光染色试剂盒100 沙苑子苷A HPLC≥98% 20mg

Ratierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISA试剂盒大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒规格：96T/48T 鲨肌醇 HPLC≥98% 20mg

小鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit 山茶甙A HPLC≥98% 20mg

小鼠补体蛋白3(C3)ELISA检测试剂盒MouseCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T 山茶甙B HPLC≥98% 20mg

人解整合素样金属蛋白酶15(ADAM15)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit 山豆根色满二氢黄酮Ⅰ HPLC≥98% 20mg

Ratai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山柑子碱 HPLC≥98% 20mg

组蛋白H2B-乙酰化检测试剂盒10/20等 山梗菜碱 HPLC≥97% 20mg

Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格：96T/48T 山姜素 HPLC≥98% 20mg

小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 ，英文名： FFA ELISA Kit 山椒子烯醇 HPLC≥98% 10mg

小鼠血清(NO)ELISA检测试剂盒Mouseniicoxide,NOELISAKit 96T/48T 山椒子烯酮 HPLC≥98% 10mg
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/5/10 10:24:30

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