详细内容
本试剂盒是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒,本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
快速银染试剂盒 | Fast Silver Stain Kit | 25次 |
产品特点:
1. 本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染,并且染色后和后续的质谱检测兼容;
2. 本试剂盒只需一小时左右即可观察到蛋白条带,90分钟内可以完成2块凝胶的银染;
3. 对于BSA蛋白,检测灵敏度可以达到0.3ng蛋白;
4. 无需使用有毒的甲醇。
注意事项:
1. 由于银染非常灵敏,操作时请注意尽量使用高纯度的水,并确保所使用的器皿非常清洁,好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套,避免皮肤和凝胶直接接触。
2. 需自备乙醇、乙酸及Milli-Q纯水或双蒸水。
3. 下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶,各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大,对于更厚的凝胶,作用时间需按照厚度的比例适当延长。
4. 本说明书所指的室温为20-25℃,操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降,各步骤需适当延长时间。
5. 银染基本显色液(5X)在低温环境下可能会出现少量沉淀,可在30-50℃水浴中溶解,并充分混匀后使用。至少后续稀释至1X后须确保完全溶解。
储存条件:室温,有效期一年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
依泽替米贝β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
安普那韦-d4 Amprenavir-d4 质量规格:美国进口 猪生长激素(GH)ELISA检测试剂盒Porcinegrowthhormone,GHELISAKit 96T/48T
4'-羟基华法林 4'-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪生长抑素(SS)ELISA检测试剂盒PorcineSomatostatin,SSELISAKit 96T/48T
6-羟基华法林 6-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒PorcineLeptin,LEPELISAKit 96T/48T
7-羟基华法林 7-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
10-羟基华法林(非对映) 10-Hydroxy Warfarin (Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA检测试剂盒PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 96T/48T
3'-羟基华法林 3'-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 96T/48T
8-羟基华法林 8-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪血管生成素1(ANG-1)ELISA检测试剂盒PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
6-苄氧基华法林 6-Benzyloxy Warfarin 质量规格:美国进口 猪血管生成素2(ANG-2)ELISA检测试剂盒PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T
奥美沙坦酸 Olmesartan Acid 质量规格:美国进口 猪血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA检测试剂盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T
猪坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-α 96T/48T 依泽替米贝酮 Ezetimibe Ketone 质量规格:美国进口
猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA检测试剂盒PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1 96T/48T 3-O-乙酰依泽替米贝 3-O-Acetyl Ezetimibe 质量规格:美国进口
猪皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA检测试剂盒PorcineCoicosterone,CO 96T/48T 依泽替米贝羟基β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe Hydroxy β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 依泽替米贝β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
猪生长激素(GH)ELISA检测试剂盒Porcinegrowthhormone,GH 96T/48T 安普那韦-d4 Amprenavir-d4 质量规格:美国进口
猪生长抑素(SS)ELISA检测试剂盒PorcineSomatostatin,SS 96T/48T 4'-羟基华法林 4'-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口
猪瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒PorcineLeptin,LEP 96T/48T 6-羟基华法林 6-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口
猪透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒PorcineHyaluronicacid,HA 96T/48T 7-羟基华法林 7-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口
猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA检测试剂盒PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cad 96T/48T 10-羟基华法林(非对映) 10-Hydroxy Warfarin (Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口
猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1 96T/48T 3'-羟基华法林 3'-Hydroxy Warfarin 质量规格:美国进口
快速银染试剂盒化线粒体0氧比(ADP/O)定量检测试剂盒20 芹菜素OβD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 芹菜素O葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 10mg
小鼠载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 ,英文名: APOC1 ELISA Kit 芹菜素O葡萄糖醛酸苷'乙酯 HPLC≥98% 10mg
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA检测试剂盒Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 96T/48T 芹糖异甘草苷 HPLC≥98% 10mg
犬碱性0酸酶(ALP)试剂盒 Canine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 秦皮苷 HPLC≥98% 20mg
英文名称HumanAngiopoietin-2ELISAKit人血管生成素-2(ANG-2)规格:96T/48T 秦皮甲素 HPLC≥98% 20mg
化线粒体膜流动性(membranefluidity)荧光检测试剂盒20 秦皮素 HPLC≥98% 20mg
RatiactParathormone,i-PTHELISA试剂盒大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 秦皮乙素 HPLC≥98% 20mg
小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA试剂盒 ,英文名: apo-B48 ELISA Kit 青蒿琥酯 HPLC≥98% 100mg
小鼠apelin12(AP12)ELISA检测试剂盒Mouseapelin12,AP12ELISAKit 96T/48T 青蒿酸 HPLC≥98% 20mg
更新时间:2024/3/25 10:12:28
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