详细内容
点击次数:1106 发布时间:2022/3/3 9:57:16
储存条件:冷冻(-20℃)
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
DNA Marker H1(100~1000bp) | DNA Ladder H1 (100~1000bp) | 50次 |
概述
DNA分子量标准Ladder H1(100~1000 bp)为即用型产品,混合有10条单一的DNA条 带:100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000 bp。
特点
条带亮度均匀,带型清晰、稳定性强,-20℃保存2年以上,经常使用可4℃甚至室温放置。Marker已含上样缓冲液和示踪染料,可直接电泳,方便使用。
应用
琼脂糖凝胶电泳或非变性PAGE胶
大鼠KI-67 elisa分析检测试剂盒
大鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)elisa分析检测试剂盒
大鼠I型胶原(COL1)elisa分析检测试剂盒
大鼠II型角蛋白,细胞骨架71(KRT71)elisa分析检测试剂盒
大鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)elisa分析检测试剂盒
大鼠凝血因子Ⅺ(F11)elisa检测试剂盒
大鼠凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)elisa检测试剂盒
大鼠凝血因子ⅩⅢ(F13)elisa检测试剂盒
大鼠凝血因子Ⅹ(F10)elisa检测试剂盒
大鼠凝血因子Ⅸ(F9)elisa检测试剂盒
DNA Marker H1(100~1000bp)人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)elisa分析检测试剂盒
人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)elisa检测试剂盒免费代测
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)elisa分析检测试剂盒
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)elisa检测试剂盒
人OX40配体(OX40L)elisa检测试剂盒
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2024/1/25 10:32:16
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